Генийн инженерийн инсулины үйлдвэрлэл

Инсулин - нойр булчирхайн дааврыг | зохицуулдаг нүүрс усны солилцоо, каздын хэвийн түвшинг хадгалахпацусанд. Бие махбодид энэ дааврын дутагдал үүсдэг.) Хамгийн ноцтой өвчний нэг болох үхлийн шалтгаан болох чихрийн шижин нь зүрх судасны өвчин, хорт хавдрын дараа гуравдугаарт ордог. Инсулин нь бөмбөрцөг жижиг | уураг нь 51 амин хүчлийн үлдэгдэл бөгөөд хоёр дисульфидын гүүрээр холбогдсон хоёр полипептидийн гинжээс бүрдэнэ. Энэ нь нэг гинжин ургийн урьдал, препросулин агуулдаг кои төв дохионы пептид (23 амин хүчлийн үлдэгдэл) ба 35 холбоос холбосон пептид (C-пептид). Дохио пептидийг салгахад 86 амин хүчлийн үлдэгдэлээс проинсулин үүсдэг бөгөөд үүнд A, B инсулины гинжин холбоо үүсдэг.С-нейтвид, энэ нь дисульфидын бонд дээр 3 доллараар шаардлагатай чиглэлийг өгдөг. С пептидийг задалсны дараа инсулин үүснэ.

Чихрийн шижингийн хэд хэдэн хэлбэрийг мэддэг. Хамгийн хүнд хэлбэр бөгөөд энэ эмчилгээнд өвчтөнд инсулин хэрэгтэй байдаг (өвчний инсулин-хамааралтай хэлбэр) нь энэ дааварыг (нойр булчирхай дахь Лангерантын арлуудын эсүүд) сонгомол үхэлд хүргэдэг. Инсулинтай эмчилгээ хийх шаардлагагүй чихрийн шижингийн хэлбэр нь илүү түгээмэл бөгөөд үүнийг зохих хоолны дэглэмийн тусламжтайгаар удирдаж, re:> ma болно. Ихэвчлэн үхэр, үхрийн нойр булчирхайг мах, консервын үйлдвэрт ашигладаггүй бөгөөд гормоны олборлолт хийдэг эмийн үйлдвэрүүдэд хөргөгчийн машинд байрлуулдаг. 100 гр кр авах бол! Таллик инсулин 800-1000 кг тэжээл шаардагдана

Инсулин авахын тулд хоёулангийнх нь гинжийг нэгтгэж, задалдаг бондын холболтыг 1963, 1965 онд хийсэн. АНУ, Хятад, Герман дахь гурван судалгааны баг. 1980 онд Данийн Ново Индустри компани нь гинжин аланины 30 дахь үлдэгдлийг треонины үлдэгдэлтэй сольж гахайн инсулинийг хүний инсулин болгон хувиргах аргыг боловсруулжээ. Инсулин хоёулаа үйл ажиллагаа, үйл ажиллагааны үргэлжлэх хугацаагаараа ялгаатай байгаагүй.

Инсулины генийн инженерийн чиглэлээр хийх ажил 20 орчим жилийн өмнө эхэлсэн. 1978 онд хархын проинсулин (АНУ) үйлдвэрлэдэг Escherichia coli-ийн омог үйлдвэрлэх тухай мессеж гарч ирэв. Тухайн жилд хүний бие даасан инсулин гинжийг эсүүд дэх нийлэг генээ илэрхийлэх замаар нэгтгэсэн.Э.коли(Зураг 5.11). Олж авсан синтетик ген бүрийг ферментийн генийн 3'төгсгөлд тааруулж (3 галактозидаза ба вектор плазмид нэвтрүүлсэн(pBR322).ЭсүүдЭ.колиийм рекомбинант плазмид болгон хувиргаснаар метионины үлдэгдэлээр бэхлэгдсэн p-galactosidase, A эсвэл B инсулин пептидийн хэсгээс бүрдсэн эрлийз (химик) уураг гарган авчээ. Цианоген бромидтой химийн уураг боловсруулахдаа пептид ялгардаг. Гэсэн хэдий ч үүссэн инсулины гинжүүдийн хооронд дисульфидийн гүүрийг хаах нь хэцүү байсан.

1981 онд мини-С-про-инсулины просулины аналогийг нэгтгэж, 35 нэгжийн С-пептидийг зургаан амин хүчлийн сегментээр сольсон: arg-arg-gly-ser-lys-arg, мөн түүний илэрхийлэлийг харуулав.Э.коли.

1980 онд В.Гилберт ба түүний хамтрагчид инсулин мРНХ-ийг харх нойр булчирхайн Р эсийн хавдраас тусгаарлаж, урвуу транскриптаз ашиглан үүнээс cDNA олж авсан. Үүссэн cDNA-г плазмид оруулсанpBR322Э.колипенициллиназа генийн дунд хэсэгт. Рекомбинант плазмид нь проинсулины бүтцийн талаархи мэдээллийг агуулдаг.MRNA орчуулгын үр дүнд пенициллиназа ба проинсулин дарааллыг агуулсан эсэд эрлийз уураг нийлэгжиж, ийм уургаас трипсинээр шингэсэн.

1978 онд Акадын удирдлага дор Биорганик химийн хүрээлэнгийн ажилтнууд. Ю.А. Овчинников, нейропептидийн синтезийг кодлодог хоёр бүтцийн генийг синтезжүүлэв.лейцин - энкефалин ба брадикинин.Нэгтгэсэн лейциний энкефалин ген хоёр "наалттай" төгсгөлтэй байв:

Үүссэн синтетик генийг E. coli P-galactosidase уургийн генийн протеймер ба проксимал хэсгийг агуулсан байгалийн ДНХ-ийн фрагменттэй хамт оруулав.Э.колиплазмид руу

Инсулин авах, генийн инженерчлэлийн арга, Биотехнологи - Хичээлийн ажил

1. Инсулины бүтэц ба үүрэг 5

1.1. Инсулины молекулын бүтэц 5

1.2. Инсулины биологийн ач холбогдол 7

1.3. Инсулины биосинтез 8

2. Генийн инженерийн инсулины синтез 10

2.1. Эмийн синтезийн генийн инженерийн аргыг ашиглах нь 10

2.2. Генийн инженерийн аргууд 11

2.3. Генийн инженерийн инсулины үйлдвэрлэл 14

Текстээс ишлэл

Түүнээс гадна эдгээр бүрэлдэхүүн хэсгүүд нь эрлийз уургийн найрлагад нэгэн зэрэг агуулагдаж болно. Үүнээс гадна, холимог уураг үүсгэх үед олон талт байдлын зарчмыг ашиглаж болно - зорилтот бүтээгдэхүүний ургацыг мэдэгдэхүйц нэмэгдүүлэх боломжтой эрлийз уураг дахь полипептидийн хэд хэдэн хуулбар байдаг.

Их Британид хүний биед идэвхитэй дааврын молекултай холбогдсон E. coli-ийг ашиглан хүний инсулины хоёр судал нийлэгжжээ. Нэг эсийн организм түүний рибосом дээр инсулин молекулыг синтезлэхийн тулд түүнийг шаардлагатай програмаар хангах, өөрөөр хэлбэл дааврын генийг нэвтрүүлэх шаардлагатай.

Ромбинант инсулиныг Е.Коли генийн аргаар боловсруулсан омгийг ашиглан Оросын ШУА-ийн хүрээлэнгээс олж авсан. Ургамлын урьдал уураг нь өсөн нэмэгдэж буй биомассаас, тоогоор илэрхийлэгддэг

Преопринсулин агуулсан нийт эсийн уургийн 40..

Инсулиныг in vitro-д хувиргах үйл явц in vivo-той ижил дарааллаар явагддаг - тэргүүлэх полипептид нь цуурч, препросулин нь исэлдүүлэгч сульфитолизийн үе шатаар инсулин болж хувирдаг ба дараа нь гурван дисульфидийн бондууд хаагдах ба C-пептидтэй энзимийн тусгаарлалт явагдана. Ионы солилцоо, гель ба HPLC хроматографийн цэвэршүүлэлт хийсний дараа өндөр цэвэршилт, байгалийн идэвхитэй хүний инсулиныг олж авдаг.

Инсулин авахын тулд 8, 9, 10-р метронины үлдэгдэлээр дамжуулан N-терминалдаа холбосон шугаман проинсулин ба Staphylococcus aureus уургийн A хэсгээс бүрдэх эрлийз уураг агуулсан плазмид орсон нуклеотидын дарааллаар омог хэрэглэнэ.

Рекомбинант омгийн эсүүдийн ханасан биомассыг тариалах нь эрлийз уураг үйлдвэрлэх эхлэлийг хангаж, тусгаарлалт, дараалсан хувиргах хоолойд инсулин үүсгэдэг.

Өөр нэг арга нь бас боломжтой: метионины үлдэгдэлээр хүний просинулин ба полихистидиний сүүлээс бүрдэх рекомбинант уураг илэрхийлэх бактерийн системд олж авах. Энэ нь Ni-агароз ба бромын цавуулаг бүхий баганууд дээрх хелат хроматографийг ашиглан тусгаарлагдсан болно.

Тусгаарлагдсан уураг нь S-sulfonated юм. Анион солилцооны давирхай ба RP (урвуу фаз) өндөр хүчин чадалтай шингэн хроматограф дээр ион солилцооны хроматографаар цэвэршүүлсэн проинсулиныг газрын зурагжуулах, масс спектрометрийн шинжилгээ хийх нь уугуул хүний проинсулины гульфидтэй таарч байгаа дисульфидийн гүүр байгааг харуулж байна.

Саяхан генийн инженерчлэлээр рекомбинант инсулин үйлдвэрлэх журмыг хялбаршуулахад ихээхэн анхаарал хандуулж байна.Жишээлбэл, та интерлейкин удирдагч пептидийн лизиний үлдэгдэлээр дамжин N-терминалд хавсаргасан проинсулинээс бүрдсэн уураг авах боломжтой

2. Уураг нь үр дүнтэй илэрхийлж, оролцуулах биед нутагшуулдаг. Тусгаарласны дараа инсулин ба С-пептидийг үйлдвэрлэх уураг нь трипсин 5, 8, 10-тай наалддаг.

Үүссэн инсулин ба С-пептидийг RP-HPLC-ээр цэвэршүүлдэг. Хатсан бүтэц бий болгоход маш их ач холбогдолтой зүйл бол зөөгч уураг ба зорилтот полипептидийн массын харьцаа юм.

Sfi I хязгаарлалтын цэгийг авч явдаг амин хүчлийн спазмуудыг ашиглан С-пептид ба трипсинтэй дараа дараагийн уураг хуваах зориулалт бүхий эх үүсвэр ба төгсгөлд хоёр аргинин үлдэгдэл нь толгойны сүүлний зарчмын дагуу холбогддог.

Хагарах бүтээгдэхүүний HPLC нь С-пептидийн задрал нь тоон хэлбэрээр явагддаг болохыг харуулж байгаа бөгөөд энэ нь аж үйлдвэрийн хэмжээнд масштабтай полипептидүүдийг үйлдвэрлэхэд олон төрлийн синтетик генийг ашиглах боломжийг олгодог.

Дүгнэлт

Радикал, ихэнх тохиолдолд чихрийн шижин өвчтэй өвчтөнүүдийн амьдрал, ажиллах чадварыг хадгалах цорын ганц арга зам бол өнөөг хүртэл инсулин юм.

Инсулиныг эмнэлзүйн практикт нэвтрүүлж, нэвтрүүлэхээс өмнө хамгийн хүнд өвчтэй хоолны дэглэм хэрэглэдэг хэдий ч I хэлбэрийн чихрийн шижинтэй өвчтөнүүдийн өвчний эхэн үеэс хойш нэг эсвэл хоёр жилийн хугацаанд үхлийн үр дагавар гарах болно.

Чихрийн шижингийн I хэлбэрийн өвчтөнүүдэд инсулины бэлдмэлээр насан туршдаа орлуулах эмчилгээ шаардлагатай байдаг. Нэг эсвэл өөр шалтгаанаар инсулиныг тогтмол хэрэглэхээ болих нь хүндрэл үүсэх, өвчтөний хурдан үхэлд хүргэдэг.

Одоогийн байдлаар чихрийн шижин өвчний тархалт нь зүрх судасны тогтолцооны өвчин, хорт хавдрын дараа гуравдугаарт ордог. Дэлхийн Эрүүл Мэндийн Байгууллагын мэдээлснээр насанд хүрэгсдийн дунд чихрийн шижингийн тархалт дэлхийн ихэнх бүс нутагт 2-5% байдаг ба хүн бүр нэмэгдэх хандлагатай байна.

1. жилд өвчтөнүүдийн тоо бараг хоёр дахин нэмэгдсэн. Эрүүл мэндийн салбарт тодорхой ахиц гарч байгаа хэдий ч инсулин хамааралтай өвчтөнүүдийн тоо жил бүр нэмэгдэж байгаа бөгөөд одоогоор Орос улсад ердөө 2 сая орчим хүн байна.

Инсулин үйлдвэрлэх хамгийн ирээдүйтэй арга бол генийн инженерчлэлийн арга юм. Генетикийн аргаар боловсруулсан инсулиныг үйлдвэрлэгч өөр өөр омгийг ашиглан А ба В-ийн гинжийг тусад нь гаргаж, дараа нь молекулыг нугалж, изоформуудыг тусгаарлаж, трипсин, карбоксепептидаза, уугуул инсулин үйлдвэрлэх замаар Э.Коли эсийн доторх проинсулиныг синтезжүүлдэг.

Гэрийн генетикийн аргаар боловсруулсан хүний инсулин бэлдмэлийг боловсруулж, чихрийн шижин өвчтэй сая сая хүмүүсийн амь насыг аврахын тулд Оросын чихрийн шижин өвчний олон асуудлыг шийдвэрлэх шинэ боломжийг нээж өгч байна.

Уран зохиол

Балаболкин М.И., Клебанова Е.М., Креминская В.М. Чихрийн шижин: оношлогоо эмчилгээний орчин үеийн талууд / Доктор, ред. Г.Л.Вышковский.-2005.- М .: RLS-2005, 2004.- 960 х.

Гавриков, А.В. Хүний рекомбинант бодисын биотехнологийн үйлдвэрлэлийг оновчтой болгох: дис. ... лаа. биол. Шинжлэх ухаан - М, 2003

Хүний генийн инженерчлэлээр хийсэн инсулин. Үйл ажиллагааны зарчмыг ашиглан хроматографийн салалтын үр ашгийг нэмэгдүүлэх. / Романчиков А.Б., Якимов С.А., Клюшниченко В.Е., Арутунян А.М., Вульфсон А.Н. // Биорганик химийн хими, 1997 - 23, № 2

Глик Б., Парснип Ж. Биотехнологийн аргыг хэрэглэхэд хяналт тавих // Б.Глик, Ж.Парснип / Молекулын биотехнологи = Молекул биотехнологи. - М.: Мир, 2002 .-- С. 517-532. - 589 х.

Глик Б., Пастернак Ж. Молекулын биотехнологи. Зарчим ба хэрэглээ. М .: Мир, 2002 он.

Дэвис Р., Ботштайн Д, Рот Ж. Генийн инженерчлэлийн арга. Бактерийн генетикийн тухай // Р.Дэвис, Д.Ботстейн, Ж.Рот / Пер. Англи хэлнээс.-М.: Мир. - 1984.- 176 х.

Эрмишин А.П.Генетикийн хувьд өөрчлөгдсөн организмууд: Үлгэр домог ба бодит байдал / A.P. Ermishin // Mn .: Tehnalogaliya.- 2004. - 118 p.

Эмийн биотехнологийн үндэс: Сурах бичиг / TP Prischep, V.S. Чучалин, K.L. Зайков, Л.К. Михалева байна. - Ростов-на-Дону: Финикс, Томск: NTL хэвлэлийн газар, 2006 он.

Патрушев Л.И. Хиймэл генетик систем. // Л.И.Патрушев / М .: Наука.- 2004 он.

Романчиков, А.Б. Хүний генийн инженерчлэлээр хийсэн инсулин. Үйл ажиллагааны зарчмыг ашиглан хроматографийн салалтын үр ашгийг нэмэгдүүлэх. / А.Б. Романчиков болон бусад.

// Биорганик химийн. 1997. № 2. х. 23

Рыбчин В.Н.Генетик инженерийн үндэс суурь // В.Н.Рыбчин / 2-р хэвлэл, Шинэчилсэн. нэмэх: Их дээд сургуулийн сурах бичиг. SPb .: SPbSTU-ийн хэвлэлийн газар. - 2002 .-- 522 с.

Щелкунов С. Н. Генийн инженерчлэл // Щелкунов С. Н. / Новосибирск: Сиб. univ. Хэвлэлийн газар. 2008.

Щелкунов, С.Н. Генийн инженерчлэл: сурах бичиг. тэтгэмж. - 2-р т., Ред., Илч. ба нэмэх. - Новосибирск: Сиб. univ. Хэвлэлийн газар, 2004 .-- 496 х.

1. Инсулины молекул дахь дисульфидийн холболтын байршил.

2. Инсулины молекул дахь амин хүчлийн үлдэгдэл

Метаболизмын гол ферментэд инсулины нөлөө

Элэгний булчингийн эд эсийн идэвхжил 1. Фосфодиэтераза 1. Фосфодиэстераза 1. LP-липаз

4. Пируватын дегидрогеназын цогцолбор

5. Фосфатаза гликоген синтаза ба гликоген фосфорлаза

5. Гликоген синтез фосфатаза b. Ацетил-КоА-карбоксилазын индукц 1. Глюкокиназа 1. Гликералдегид фосфат дегидрогеназа

6. Глюкоз-6-фосфат дегидрогеназын дарангуйлал Фосфоэнолпируватын карбоксиназ

Зураг. 3 Лангергантын арлын β-эс дэх инсулин биосинтезийн схем. ER - эндоплазмын торлог бүрхэвч. 1 - дохионы пептид үүсэх, 2 - препросулин синтез, 3 - дохионы пептидийн задрал, 4 - просинулийг Голги аппарат руу тээвэрлэх, 5 - просинулиныг инсулин ба С-пептид болгон хувиргах, инсулин ба С-пептидийг нарийн ширхэгтэй мөхлөгт оруулах, 6 - инсулины шүүрэл. ба С пептид.

4. Инсулиныг өмнөх хүмүүсээс нь нэгтгэх ерөнхий схем

Зураг. 5 Хоёр тусдаа гинжин хэлхээ үүсгэх замаар инсулины синтез

Генетикийн аргаар боловсруулсан хүний инсулин авах арга

Энэхүү шинэ бүтээл нь биотехнологийн чиглэлээр, ялангуяа чихрийн шижин өвчнийг эмчлэхэд хэрэглэдэг эм үйлдвэрлэхэд генийн аргаар боловсруулсан хүний инсулин үйлдвэрлэхтэй холбоотой юм.

Энэхүү арга нь хүний уураг, Escherichia coli BL21 / pPINS07 (BL07) эсвэл Escherichia coli JM109 / pPINS07 агуулсан эрлийз уургийн үйлдвэрлэгч омгийг тариалах замаар явагдаж, эрлийз уураг агуулсан орцыг ялгаж, эсүүдийг задалдаг.

Дараа нь оролтын биеийг урьдчилан угааж, уураг нэгэн зэрэг уусгаж, 5-10 мМ дитиотреитол ба 1 мМ EDTA бүхий буферт дисульфидын холболтыг сэргээж, ион солилцох хроматографийн аргаар өөрчлөгдсөн флюресцийг сэргээж, цэвэршүүлдэг.

Эрлийз уургийн задралыг трипсин ба карбоксептидаз В-ийн хамтарсан гидролизоор гүйцэтгэдэг. Эрлийз уураг, трипсин ба карбоксептидаз В 4000: 0.6: 0.9.

Инсулиныг цэвэршүүлэх ажлыг гидрофобик хроматографи буюу урвуу фазын өндөр хүчин чадалтай шингэн хроматографи, гель шүүлтүүрээр гүйцэтгэж, инсулиныг цайрын давс байгаа бол талстжуулалтаар тусгаарлана. Шинэ бүтээл нь генийн гаралтай хүний инсулин авах процессыг багасгаж, түүний гарцыг нэмэгдүүлэх боломжийг олгодог.

Энэхүү шинэ бүтээл нь биотехнологийн чиглэлээр, ялангуяа чихрийн шижин өвчнийг эмчлэхэд хэрэглэдэг эм үйлдвэрлэхэд генетикийн аргаар боловсруулсан хүний инсулин үйлдвэрлэхэд хамаарна.

Орчин үеийн диабетологийн гол ололтууд болон Дэлхийн эрүүл мэндийн байгууллагын зөвлөмжид үндэслэн Европын орнууд 2001 он гэхэд хүний инсулин хэрэглэх шилжилтийг дуусгасан. Үүнтэй холбогдуулан ДНХ-ийн рекомбинант технологийг ашиглан инсулин үйлдвэрлэх аргыг хөгжүүлэх нь нэн тулгамдсан ажил юм.

Хүний генетикийн аргаар боловсруулсан инсулиныг үйлдвэрлэхэд ашигладаг. Энэ нь протеинулин үйлдвэрлэдэг E. Coli-ийн омог үйлдвэрлэх, стафилококкийн уураг А-ийн хоёр синтетик IgG-ийг нэгтгэх дарааллыг агуулдаг.

Энэ арга нь бактерийн эсийг устгах, проинсулин агуулсан Taurus-ийг авах, Taurus-ийг уусгах, проинсулиныг исэлдүүлэх сульфитолиз, түүний нөхөн төлжилт, өөрчлөгдсөн уураг холиний хроматографаар цэвэрлэх, проинсулин фермент бүхий проинсулиныг цэвэрлэх (трипсин ба карбоксипептидазын цэвэршилттэй цэвэршилт). хроматографи (Нилсон Ж., Йонассон П., Самуэлссон Э., Стахл С., Ухлен М. "Хүний инсулин ба түүний С-пептидийн нэгдсэн үйлдвэрлэл", Биотехнологийн сэтгүүл, 1996, v.48, s.241-250) Байна.

Энэ аргын сул тал нь бүтээгдэхүүний өртөг өндөр, зорилтот бүтээгдэхүүнд агуулагдах инсулин угаалгын нунтаг үйлдвэрлэхэд ашиглах явдал юм.

Үйлдвэрлэгчийн омгийн эсийг өсгөхөөс бүрддэг генетикийн гараар бүтээгдсэн хүний инсулин үйлдвэрлэхэд мэдэгдэж байгаа арга.

Coli DN5 a / pVK100, нянгийн эсийг хэт авианы задралаар устгадаг, усанд уусдаг хольцоос эрлийз уураг агуулсан орцыг центрифугалах замаар тусгаарлаж, 8 М мочевин, 1 мМ дитиотреитол, 0,1 М Tris-HCl агуулсан буферт агуулагдах бичил биетнийг задална. рН 8.0, 12-16 цагийн турш.

Уусдаггүй хольцыг төвөөс зугтах замаар устгадаг бөгөөд үүний дараа дитиотреитолын концентрацийг 10мм хүртэл нэмэгдүүлж, дисульфидын холболтыг 1 цаг 37С-т сэргээнэ. Уусмалыг хүйтэн усаар 5 удаа шингэлж, рН 4.5 болгон тохируулж, тунадас үүсгэхийн тулд 2 цаг 4 ° С-т өсгөв.

Эрлийз уураг агуулсан тунадасыг центрифугалтаар ялгаж, нөхөн төлжүүлэн, хүйтэн усанд 10-12 рН-ээр хурдан уусгаад дараа нь 10 мМ глицин буфер, рН 10.8 -аар шингэлж, шөнөдөө 4 0С-т хадгална. Хэт хэт улаан туяаны дараа уусмалыг Sephadex G-50 баганад гель шүүлтүүрт хийж, 10 мМ глицин буферээр сунгасан.

Нэгдэл уураг агуулсан фракцуудыг цуглуулж, хэт улайруулж, хөлдөөж хатаана. Үүссэн хайлуулах уураг нь 0.08 М Трис-HCl буфер буюу рН 7.5-т 10 мг / мл-ийн концентрацид уусдаг ба трипсин ба карбоксепептидаз В-тай нэгэн зэрэг наалддаг (карбоксептидаза В-ийн харьцаа: трипсин: хайлуулах уураг 0.3: 1: 10) 37 30 минут байлгана.

Дараа нь изопропанолыг 40% нэмнэ. Энэхүү хольцыг DEAE-Sephadex A-25 баганад хроматографаар хийж, 0.05 М Tris-HCl буфер, рН 7.5-тай 40% изопропанол бүхий натрийн хлоридын шугаман градиент бүхий 0-ээс 0.1 м-ийн хооронд хэлбэлздэг. Изопропанолыг зайлуулсны дараа натрийн хлоридын агууламж өндөр байна. 25% хүртэл нэмэгдэж, рН-ийг 2.0 болгож, инсулины тунадас цуглуулна.

(Чен Ж.-Ц., Жан Х.Т., Ху М.- Н., Тан Ж.- Г.) “Хүний метилиз-просинулин агуулсан Е. Колийн систем дэх хүний инсулин үйлдвэрлэх. прекурсор "Хэрэглээний биохими ба биотехнологи, 1995, v. 55, хуудас 5-15).

Энэ аргын сул талууд нь эхний үе шатанд гель шүүлтүүрийг ашиглах явдал бөгөөд энэ нь их хэмжээний сорбент, эрлийз уураг задлахад хэрэглэгддэг олон тооны ферментийг шаарддаг.

Генетикийн аргаар боловсруулсан хүний инсулиныг бий болгох алдартай арга, үүнд Escherichia coli JM109 / pPINS07-ийн үйлдвэрлэгч омгийг тариалах, бактерийн эсийг задалснаар устгах, эрлийз уураг агуулсан орцын биеийг ялган салгах, шүвтэр, дитиотреитол агуулсан буферт уусгах, уураг өөрчлөн боловсруулж, цэвэршүүлэх. 40% -ийн изопропанол дахь хольцын нэгдлүүдийн хур тунадас, KM-sepharose дээрх хроматографи, түүний трипсин ба карбоксепептидаза В-тай дараалсан цэвэрлэгээ трипсинолизийг С-Сефароз дээр хроматографаар хийж, 0.03-0.1 М аммонийн ацетатын буфер pH 5.0-6.0, 6 М мочевин агуулсан, 0-ээс 0.5 М-ийн хоорондох шугаман градиент бүхий уургийн уусмалаар хийдэг. буфер, карбоксептидаза В-тай салгасны дараа олж авсан инсулины фракцыг урвуу фазын өндөр хүчин чадалтай шингэн хроматограф (RP HPLC) -ээр гель шүүлтүүрээр цэвэрлэв (Пат. RF № 2141531, MKI C12P 21/02, publ). 1999 он)

Аргын сул талууд нь эрлийз уураг цэвэршүүлэх үе шатанд их хэмжээний мочевин, органик уусгагч бодис хэрэглэх явдал юм.

Чихрийн шижингийн мэргэжилтэн

Инсулин хэрэглэхээс өмнө чихрийн шижин өвчтэй өвчтөний дундаж наслалт 10 жилээс хэтрэхгүй байв. Энэ эмийг зохион бүтээсэн нь сая сая өвчтөнийг аварч чадсан юм. Хүний генийн инженерийн инсулин бол шинжлэх ухааны хамгийн сүүлийн дэвшил юм.

Олон жилийн шаргуу хөдөлмөрийн үр дүн

Генийн инженерчлэл (рекомбинант) бэлдмэлийг зохион бүтээхээс өмнө инсулиныг үхэр, гахайн нойр булчирхайгаас тусгаарлаж байжээ.

Шаазан инсулин ба хүний ялгаа нь зөвхөн ганц амин хүчил юм

Мансууруулах бодисыг олж авах энэ аргын сул тал:

биологийн түүхий эдийг хадгалах, тээвэрлэх нарийн төвөгтэй байдал,
малын хомсдол
нойр булчирхайн дааврыг хуваарилах, цэвэрлэхтэй холбоотой бэрхшээлүүд,
харшлын урвал өндөр эрсдэлтэй.

1982 онд биореактор дахь хүний байгалийн инсулиныг синтезжүүлснээр биотехнологийн шинэ эрин эхэлсэн. Хэрэв инсулин эмчилгээний эхэн үед эрдэмтдийн зорилго бол зөвхөн өвчтөний амьд үлдэх байсан бол бидний үед шинэ эмийг боловсруулах нь өвчний тогтвортой нөхөн олговрыг олж авахад чиглэгддэг. Шинжлэх ухааны судалгааны гол зорилго нь чихрийн шижин өвчтэй өвчтөний амьдралын чанарыг сайжруулах явдал юм.

Орчин үеийн технологи

Бэлтгэх аргаас хамааран эмийн төрөл:

Генийн инженерийн рекомбинант

Үйлдвэрлэлийн хувьд генетикийн хувьд өөрчлөгдсөн E. coli ашигладаг. Ашиг тус:

харшлын урвал байхгүй,
үйлдвэрлэлийн үр ашиг,
цэвэршүүлэлтийн өндөр зэрэг.

Генетикчдийн хамгийн дуртай зүйл бол E. coli юм

Генетикийн хувьд өөрчлөгдсөн

Эхлэх материал бол гахайн инсулин юм. Үүнийг генийн инженерчлэлийн аргаар өөрчилдөг.

Гормоны бүтэц

Синтетик

Зохиомлоор нийлэгжсэн эм нь түүний найрлагад хүний инсулинтай бүрэн ижил байдаг.

Мансууруулах бодис үйлдвэрлэх

Мансууруулах бодис хэрэглэсний дараа бие махбодид юу тохиолддог вэ?

Эсийн мембраны рецептортой холбогдон инсулин нь дараахь процессуудыг гүйцэтгэдэг цогцолбор үүсгэдэг.

Эсийн доторхи глюкозын тээвэрлэлтийг сайжруулж, түүний шингээлтийг хөнгөвчилдөг.
Глюкозыг боловсруулахад оролцдог ферментийн ялгаралтыг дэмждэг.
Элэг дэх гликоген үүсэх хурдыг бууруулдаг.
Өөх, уургийн солилцоог идэвхжүүлдэг.

Арьсан доорх эмчилгээ хийлгэсэн тохиолдолд инсулин 20-25 минутын дараа идэвхжиж эхэлдэг. Мансууруулах бодисын үргэлжлэх хугацаа 5-аас 8 цаг байна. Энэ нь инсулиназа ферментээр ялгарч, шээсээр ялгардаг. Мансууруулах бодис нь ихэсийг хөндлөн гарахгүй бөгөөд хөхний сүүнд ордоггүй.

Генетикийн аргаар боловсруулсан инсулиныг хэзээ тогтоодог вэ?

Хэрэв яаралтай тусламж шаардлагатай бол

Генетикийн аргаар боловсруулсан хүний инсулиныг дараахь тохиолдолд хэрэглэдэг.

1 эсвэл 2-р хэлбэрийн чихрийн шижин. Энэ нь бие даасан эмчилгээ эсвэл бусад эмтэй хослуулан хэрэглэдэг.
Амны хөндийн гипогликемийн эмэнд тэсвэртэй.
Жирэмсэн эмэгтэйчүүдэд чихрийн шижинтэй.
Бөөр, элэгнээс хүндрэл гарсан тохиолдолд.
Уртасгасан инсулин руу шилжих үед.
Мэс заслын өмнөх үед.
Амьдралд аюул учруулж болзошгүй нөхцөлд (гиперосмоляр эсвэл кетоацидотик кома).
Онцгой байдлын үед (хүүхэд төрөхөөс өмнө, бэртэл гэмтэлтэй).
Хэрэв арьсны дистрофи гэмтэл байгаа бол (шархлаа, фурункулоз).
Халдварын суурь өвчний эсрэг чихрийн шижингийн эмчилгээ.

Хүний генийн инженерийн инсулин нь сайн тэсвэртэй бөгөөд харшлын урвал үүсгэдэггүй тул байгалийн даавартай яг ижил байдаг.

Тогтмол хяналт хийх нь чухал юм!

Дараах тохиолдолд эмийг томилохыг хориглоно.

цусан дахь сахарын хэмжээг бууруулах
эмэнд хэт мэдрэг байдал.

Бэлдмэлийг томилсоны дараах эхний өдрүүдэд өвчтөнийг сайтар хянах шаардлагатай.

Гаж нөлөө

Уртикарийн аюул! Квинкийн хаван!

Ховор тохиолдолд, инсулин хэрэглэх үед дараахь хүндрэлүүд гардаг.

харшлын урвал (чонон хөрвөс, Квинкийн хаван, арьс загатнах),
цусан дахь сахарын огцом бууралт (эм нь бие махбодоос татгалзсан, эсвэл дархлаа судлалын зөрчил үүссэнээс үүсдэг),
ухамсар доройтсон
хүнд тохиолдолд, гипогликемийн кома үүсэх боломжтой.
ам цангах, ам хуурайших, нойрмоглох, хоолны дуршилгүй болох,
гипергликеми (халдварыг эсвэл халуурах эмийн эсрэг эмийг хэрэглэх үед),
нүүрний улайлт
Захиргааны бүс дэх орон нутгийн хариу урвал (арьсан доорх өөхийг шатаах, загатнах, атрофия эсвэл пролифераци).

Заримдаа эмэнд дасан зохицох нь хавдар, харааны бэрхшээл зэрэг эмгэг дагалддаг. Эдгээр илрэл нь ихэвчлэн хэдэн долоо хоногийн дараа алга болдог.

Генетикийн аргаар боловсруулсан инсулиныг эмийн санд яаж олох вэ?

Эмийг парентерал эмчилгээнд хэрэглэх боломжтой.

"Биосулин"	Үйл ажиллагааны дундаж хугацаа
Актрапид	Богино нөлөө үзүүлдэг инсулин
Генсулин	Бифасик бэлтгэл (богино ба дунд хугацааны инсулинуудын хослол)
Ринсулин	Түргэн эффект
Хумалог	Эм тариа хийхдээ тариурын үзэг хэрэглэдэг.

Өвчтөний бие даасан шинж чанарыг харгалзан инсулины бэлдмэлийг сонгох нь хэцүү биш юм.

Хэрэглэх нөхцөл

Ихэнх тохиолдолд арьсан доорх инсулиныг хэрэглэдэг.

Яаралтай тохиолдолд эмийг судсаар хийдэг.

Өвчтөний хүнд нөхцөлд

Туршлагатай чихрийн шижинтэй хүн ч гэсэн эмийг хэрэглэхдээ алдаа гаргадаг.

Хүндрэлээс зайлсхийхийн тулд дараахь зүйлийг хийх шаардлагатай байна.

Хэрэглэхийн өмнө эмийн хүчинтэй хугацааг шалгана уу.
Хадгалах зөвлөмжийг анхаарч үзэх хэрэгтэй: Сагс савыг хөргөгчинд хадгалах хэрэгтэй. Боловсруулсан лонхыг өрөөний температурт харанхуй газар хадгална.
Зөв тунг санахаа мартуузай: эмчийн зааврыг дахин уншина уу.
Тарилга хийхийн өмнө тариураас агаарыг зайлуулах шаардлагатай.
Арьс нь цэвэр байх ёстой, гэхдээ эмийн үр нөлөөг бууруулдаг тул архи, согтууруулах ундаа боловсруулахад хэрэглэх нь зохисгүй юм.
Тарилга хийх хамгийн тохиромжтой газрыг сонго. Хэвлийн арьсан дор нэвтрүүлэхэд эм хурдан үйлчилнэ. Gluteal атираа эсвэл мөрөнд нэвтрүүлэхэд инсулиныг удаан шингээдэг.
Гадаргуугийн талбайг бүхэлд нь ашиглах (орон нутгийн хүндрэлээс урьдчилан сэргийлэх). Тарилга хоорондын зай дор хаяж 2 см байх ёстой.
Булчинд орох эрсдлийг багасгахын тулд арьсыг цайруулж тосонд дараарай.
Тариурыг арьсан дор өнцгөөр тарааж, эм уухгүй.
Ходоодонд тарьсан тохиолдолд богино хугацааны инсулиныг хоол идэхээс 20 минутын өмнө хийдэг. Мөр эсвэл өгзөгийг сонгох тохиолдолд хоол идэхээс гучин минутын өмнө.

Бусад эмүүдтэй хослуулах

Ихэнхдээ чихрийн шижин өвчтэй бол өвчтөн хэд хэдэн эм уудаг. Бусад эмүүдтэй хослуулан хэрэглэх нь генетикийн гаралтай инсулины эмчилгээний үр нөлөөг бий болгодог.

Хүндрэлээс урьдчилан сэргийлэхийн тулд та дараахь зүйлийг мэдэх хэрэгтэй.

Цусан дахь сахарын хэмжээг бууруулах замаар генийн инженерийн инсулины үр нөлөөг нэмэгдүүлэх	Сульфонамид. MAO дарангуйлагчид (фуразолидон). ATP дарангуйлагчид (каптоприл). Нестероид бус үрэвслийн эсрэг (diclofenac, aspirin). Андрогенууд. Нянгийн эсрэг эм (квинидин). Анаболик стероидууд. Тетрациклиний антибиотик (доксициклин). Теофиллин. Морфин.	Шээсний замын халдварыг эмчлэхэд ашигладаг алдартай эм Доксициклин
Инсулины үйл ажиллагааг бууруулна	Глюкокортикоидууд (преднизон, гидрокортизон). Эстроген агуулсан аман жирэмслэлтээс хамгаалах эм. Шээс хөөх эм Амфетаминууд. Бамбай булчирхайн даавар. Симпатомиметик (адреналин, мезатон, дофамин). Глюкагон.	Анхаарлаа хандуулаарай, шээс хөөх эм

Хэт их хэрэглэх

Зарим тохиолдолд инсулины хэрэглээ нь цусан дахь сахарын хэмжээ гэнэт буурахад хүргэдэг. Асуудал нь тунг буруу сонгосноос болдог.

Гипогликемийн эхний шинж тэмдэг:

сул тал
арьсны хөнгөвчлөх
сэтгэлийн түгшүүрийн байдал
толгой эргэх
хуваагдмал байдал
гар, хөл, хэл, ам
мөчдийн чичрэх
хүйтэн хөлс
өлсгөлөнгийн хүчтэй мэдрэмж
толгой өвдөх.

Аймшиг; сайн сайхан байдал гэнэт доройтох

Хэрэв та ийм шинж тэмдгийг өөрөө анзаарсан бол амархан шингэцтэй нүүрс ус агуулсан зүйлийг хурдан идэх хэрэгтэй. Энэ нь жигнэмэг, чихэр, нэг хэсэг элсэн чихэр эсвэл цагаан талх байж болно. Амтат цай ийм нөхцөлд тусалдаг.

Хэрэв нөхцөл байдал муудаж байвал түргэн тусламж дуудах ёстой. Гипогликеми нь өвчтөний кома болон үхэлд хүргэж болзошгүй юм.

Рекомбинант инсулин аюултай юу?

Сайн байцгаана уу Рекомбинант инсулин нь байгалийнхаас ялгаатай биш юм. Үүнийг олж авахын тулд генетикийн хувьд өөрчлөгдсөн бактерийг ашигладаг.

Генийн инженерийн технологийг ашигласнаар инсулин ген агуулсан рекомбинант ДНХ-ийг E. coli-ийн эсэд суулгадаг. Генетикийн хувьд өөрчлөгдсөн организмууд үржиж гормон үүсгэдэг. Мансууруулах бодис нь маш үр дүнтэй бөгөөд цэвэршилт ихтэй байдаг.

Инсулин II хэсэг. Микробиологийн инсулины үйлдвэрлэл

хамаарлын бүрэлдэхүүн хэсэг - эрлийз уургийн тусгаарлалтыг ихээхэн хөнгөвчилдөг.

Энэ тохиолдолд эдгээр бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн аль аль нь эрлийз уургийн найрлагад нэгэн зэрэг оршиж болно.

Үүнээс гадна, эрлийз уураг үүсгэх үед олон талт байдлын зарчмыг ашиглаж болно (өөрөөр хэлбэл, зорилтот полипептидийн хэд хэдэн хуулбарыг эрлийз уураг агуулдаг) бөгөөд энэ нь зорилтот бүтээгдэхүүний ургацыг мэдэгдэхүйц нэмэгдүүлэх боломжтой юм.

2 E. coli эсэд проинсулиныг илэрхийлнэ ..

Уг бүтээлд зохиогчид шугаман проинсулин ба Staphylococcus aureus уургийн A хэсгээс бүрдэх метионины үлдэгдэлээс бүрдсэн эрлийз уураг илэрхийлсэн плазмид дотор оруулсан нуклеотидын дарааллаар JM 109 N1864 омгийг ашигласан.

Рекомбинант омгийн эсүүдийн ханасан биомассыг тариалах нь эрлийз уураг үйлдвэрлэх эхлэлийг хангаж, тусгаарлалт, дараалсан хувиргах хоолойд инсулин үүсгэдэг.

Өөр нэг судлаачдын бүлэг нь метионины үлдэгдэлээр хүний проинсулин ба полихистидиний сүүлээс бүрдэх нэгдлийн бактерийн илэрхийлэх систем дэхь рекомбинант уураг хүлээн авсан. Ни-агарозын багана дээр хелат хроматограф ашиглан тусгаарлагдсан бөгөөд цианоген бромидоор шингэсэн.

Анион солилцооны давирхай ба RP (урвуу фаз) HPLC (ион солилцооны хроматографи) дээр ион солилцооны хроматографаар цэвэршүүлсэн проинсулиныг газрын зурагжуулах, масс спектрометрийн шинжилгээ хийх нь уугуул хүний проинсулины гульфидтэй тохирох дисульфидийн гүүр байгааг харуулж байна. Прокариот эсүүдэд генетикийн инженерчлэлээр хүний инсулин үйлдвэрлэх шинэ, сайжруулсан аргыг боловсруулсан тухай баримт бичигт дурджээ. Зохиогчид үүссэн инсулин нь түүний бүтэц, биологийн идэвх нь нойр булчирхайгаас тусгаарлагдсан гормонтой ижил болохыг тогтоожээ.

Саяхан генийн инженерчлэлээр рекомбинант инсулин үйлдвэрлэх журмыг хялбаршуулахад ихээхэн анхаарал хандуулж байна. Тиймээс зохиогчид лизиний үлдэгдэлээр проинсулины N-терминалд хавсаргасан интерлейкин 2-ийн удирдагч пептидээс бүрдэх уураг олж авсан.

Уураг үр дүнтэй илэрхийлж, оруулах биед нутагшуулсан. Тусгаарласны дараа уургийг трипсинээр шингээж, инсулин ба С-пептид үүсгэдэг. Судлаачдын өөр нэг бүлэг нь үүнтэй ижил арга хэмжээ авав.

Проинсулин ба стафилококкийн хоёр нийлэг доминоос бүрдэх уураг нь IgG-ийг хооронд нь холбосон биед нэвтрүүлсэн боловч илэрхийлэл өндөр байв. Уургийг IgG ашиглан холболтын хроматографаар тусгаарлаж трипсин, карбоксептидаза В-ээр боловсруулсан.

Үүссэн инсулин ба С-пептидийг RP HPLC-ээр цэвэршүүлсэн. Хатсан бүтцийг бий болгоход зөөгч уураг ба зорилтот полипептидийн массын харьцаа маш их ач холбогдолтой байдаг.

Тиймээс уг бүтээл нь хайлуулах бүтцийн бүтцийг тайлбарласан бөгөөд үүнд хүний сийвэнгийн альбуминыг уураг агуулсан полипептид болгон ашигладаг байжээ. Үүнд нэг, гурав, долоон С-пептид хавсаргасан.

С-пептидүүд нь Sfi I хязгаарлалтын цэгийг авч явдаг амин хүчлийн зай дамжуулагч ба трипсинтэй дараа нь уураг хуваах зорилгоор spacer-ийн эхэн ба төгсгөлд хоёр аргинин үлдэгдэл ашиглан толгойны сүүл дээр холбогдсон байв. Хагарах бүтээгдэхүүний HPLC нь С-пептидийн задрал нь тоон үзүүлэлт гэдгийг харуулсан бөгөөд энэ нь үйлдвэрлэлийн хэмжээнд зорилтот полипептидүүдийг олж авахын тулд multimeric нийлэг генийг ашиглах боломжийг олгодог.

Энэхүү бүтээлд Arg32Tyr-ийг орлуулах агуулсан проинсулин мутантын бэлтгэлийг тодорхойлсон болно. Энэ уураг трипсин, карбоксептидаза В-тай хавсарч байх үед уугуул инсулин, тирозины үлдэгдэл агуулсан С-пептид үүссэн. Сүүлийнх нь 125I гэсэн тэмдэглэгээ хийсний дараа радиоиммуноассейд идэвхтэй ашиглагддаг. 3 Инсулиныг цэвэршүүлэх.

Мансууруулах бодис үйлдвэрлэх зориулалттай инсулин нь өндөр цэвэршилттэй байх ёстой. Тиймээс үйлдвэрлэлийн үе шат бүрт олж авсан бүтээгдэхүүний цэвэр байдлыг өндөр үр дүнтэй хянах шаардлагатай. Өмнө нь RP ба IO (ионы солилцоо) HPLC нь проинсулин-S-сульфонат, проинсулин, бие даасан A- ба B-гинжүүд ба тэдгээрийн S-сульфонатуудыг тодорхойлоход хэрэглэгддэг байв.

Флюресцент инсулины деривативт онцгой анхаарал хандуулдаг. Уг бүтээлд зохиогчид хүний инсулины үйлдвэрлэлийн бүхий л үе шатанд бүтээгдэхүүнийг шинжлэхэд хроматографийн аргын хэрэглээ ба мэдээллийн талаар судалж, үр дүнд нь гарсан бүтээгдэхүүнийг үр дүнтэй ялгаж, шинжлэх зорилгоор хроматографийн үйл ажиллагааны хуваарийг гаргасан.

Үүнээс гадна инсулины цэвэр байдал, хэмжээг тодорхойлох үйл явцыг автоматжуулах, хурдасгах аргыг боловсруулж байна.

Энэхүү баримт бичигт инсулиныг тодорхойлоход RP шингэн хроматографийг электрохимийн илрүүлэлтээр ашиглах боломжийг судалж, Лангергантын арлаас тусгаарлагдсан инсулиныг иммунофосфатын хроматографаар спектрометрийн илрүүлэлтээр тодорхойлох аргыг боловсруулсан болно.

Уг ажилд капсулын электрофорезыг ашиглан лазер-флуоресцент илрүүлэгч ашиглан инсулиныг богино хугацаанд микро-тодорхойлох боломжийг судалж үзэв. Шинжилгээнд дээжинд фенилотиоцианат (FITC) гэсэн тодорхой хэмжээний инсулин болон моноклональ инсулины эсрэгбиемийн Fab фрагментийг нэмж оруулан гүйцэтгэдэг. Шошгон болон ердийн инсулинууд нь Fab цогцолбортой өрсөлдөх чадвартай байдаг. FITZ гэсэн шошготой инсулин ба түүний Fab-тай цогцолборыг 30 секундын дотор салгадаг.

Саяхан олон тооны бүтээлүүд инсулин үйлдвэрлэх аргыг боловсронгуй болгох, түүн дээр үндэслэсэн тунгийн хэлбэрийг бий болгоход зориулагдсан болно.

Жишээлбэл, АНУ-д гепатосец инсулины аналоги нь патентлагдсан, А гинжийн 13-15, 19-р байрлал, В-гинжин 16-р байрлалд янз бүрийн амин хүчлийн үлдэгдэл нэвтрүүлсэнтэй холбоотойгоор байгалийн гормоноос ялгаатай.

Олж авсан аналоги нь чихрийн шижин өвчнийг эмчлэхэд төрөл бүрийн парентерал (судсаар, судсаар, арьсан доорх), судсаар, тунг хэлбэрээр эсвэл капсул хэлбэрээр тусгай капсул хэлбэрээр ашигладаг. Тарилга хийхгүйгээр удирдаж буй тунгийн хэлбэрийг бий болгох нь онцгой ач холбогдолтой юм.

Протеолит ферментийн дарангуйлагчтай өөрчилсөн полимер гидрогелийн эзэлхүүнтэй инсулин иммобилж буй макромолекулын аман удирдлагын тогтолцоог бий болгох тухай баримт бичигт тусгажээ. Ийм эмийн үр нөлөө нь арьсан дор нэвтрүүлсэн уугуул инсулины үр нөлөөний 70-80% юм.

Өөр нэг ажилд, мансууруулах бодисыг 1-4: 100 харьцаатай, цусны бүлэгнэлтийн дэргэд инсулиныг цусны улаан эсүүдтэй нэг алхамаар өсгөх замаар олж авдаг.Зохиогчид 1000 нэгж / г идэвхитэй мансууруулах бодис хүлээн авсан, аман хэрэглэсний дараа үйл ажиллагаа бүрэн хадгалагдаж, лиофилжсэн хэлбэрээр хэдэн жилийн турш хадгалагддаг.

Инсулин дээр суурилсан шинэ эм, тунгийн хэлбэрийг бий болгохоос гадна чихрийн шижин өвчний асуудлыг шийдвэрлэх шинэ аргуудыг боловсруулж байна.

Тиймээс зохиогчид GLUT2 глюкозын дамжуулагч уураг cDNA-г өмнө нь HEP G2 инсулины эсийн бүрэн хэмжээний инсулин cDNA-ээр тогтвортой шилжүүлэн суулгасан.

Олж авсан HEP G2 Insgl клонуудад глюкоз нь ердийн инсулины шүүрлийг өдөөж, бусад шүүрлийн өдөөгчд хариу урвал үүсгэдэг.

Иммуноэлектрон микроскопоор Лангерханы арлын б-эсүүд дэх мөхлөгт төстэй инсулин агуулсан мөхлөгийг илрүүлжээ. Генийн инженерийн аргаар олж авсан "хиймэл б-эс" -ийг 1-р хэлбэрийн чихрийн шижин өвчнийг эмчлэхэд ашиглах боломж одоо маш их яригдаж байна.

Практик асуудлыг шийдвэрлэхийн зэрэгцээ инсулины үйл ажиллагааны механизм, молекул дахь бүтцийн болон функциональ харилцааг судалдаг. Судалгааны аргуудын нэг нь инсулины янз бүрийн деривативуудыг бий болгох, тэдгээрийн физик, химийн болон дархлаа судлалын шинж чанарыг судлах явдал юм 23, 24.

Дээр дурдсанчлан инсулин үйлдвэрлэх хэд хэдэн арга нь энэ дааврыг урьдал (проинсулин) хэлбэрээр олж авах бөгөөд инсулин ба С-пептид рүү ферментийн аргаар задлахад оршдог. Одоогийн байдлаар С-пептидийн биологийн идэвхжил байгааг харуулсан бөгөөд энэ нь инсулины хамт эмчилгээний зориулалтаар ашиглах боломжтой болжээ.

Энэ цувралын дараагийн нийтлэлд С-пептидийн физик-химийн болон биологийн шинж чанар, түүнийг бэлтгэх аргуудыг авч үзэх болно.

Мансууруулах бодис үйлдвэрлэх биотехнологи

STGh-ийн 20K хувилбарыг олж авах нь сонирхолтой юм. Гормоны урт хугацааны үйл ажиллагааг олж авахын тулд зөвхөн STH-ийн янз бүрийн хэлбэрийг төдийгүй иммобилжсэн STH-ийг олж авах, судлах нь ирээдүйтэй ажил юм. STHch-ийг удаан хугацаагаар авах боломжтой анхны аргыг боловсруулсан болно.

STH үйлдвэрлэхтэй зэрэгцэн аденогипофиз дааврыг үйлдвэрлэх өвөрмөц технологи, түүний дотор бүх төрлийн өвөрмөц, GST-ийн зарим өөрчлөлтийг оруулсан болно. Генийн инженерчлэлээр олж авсан STH (соматоген) эмчилгээний эмийг бий болгох зорилтот хөтөлбөрийг хэрэгжүүлэх нь чухал ач холбогдолтой юм.

Эмнэлзүйн туршлагаас харахад богинохон хугацааны эмчилгээг оновчтой болгохын тулд арсеналид янз бүрийн технологи, тэр байтугай аргууд (MF, Ausomatin, Somatogen) -аас олж авсан ижил төстэй эмийн бэлдмэлүүд байх нь зүйтэй.

HSCH-ийн нэг бэлдмэлийг удаан хугацаагаар (олон жилийн турш) эмчлэх нь бие махбодид мэдрэмтгий чанар буурахад хүргэдэг.

Зарим талаараа энэ нь эсрэгбие үүссэний үр дүн байж болох ч гол шалтгааныг гормоны боловсруулалт, боловсруулалтын түвшинд эрэлхийлэх хэрэгтэй.

GST-тай хамтран ажиллах, түүнчлэн нууцлагдсан даавар ба тэдгээрийн янз бүрийн хэлбэрийн цогц судалгаа нь байгалиас бий болгосон системийг судалж, илүү сайн ойлгох боломжийг олгодог. Бие махбодид STH-ийн төрөл бүрийн хэлбэрүүд байгаа нь тэдгээрийн боломжтой, ашиглах боломжтойг харуулж байна, жишээлбэл, эмнэлэгт.

STHch-ийн шинэ бэлдмэлийг бий болгохдоо юуны өмнө STHch мономерын адил байгалийн гаралтай дааврын төрөл зүйлд анхаарлаа хандуулж, шаардлагатай бол генийн инженерчлэлээр хэмждэг.

GST-ээс STHch бэлдмэл үйлдвэрлэхэд аденогипофизын бусад дааврыг (LGH, FSHch, TTGch болон бусад) үйлдвэрлэх цогц үйлдвэрлэлийн технологи амжилттай хэрэгжиж байна. Шинэ дэвшилтэт аргуудыг (холболтын хроматографи гэх мэт) нэвтрүүлэх замаар үйлдвэрлэлийг оновчтой болгох шаардлагатай байна.

), нэгдсэн технологийг ашиглан өндөр цэвэр дааврыг хүлээн авах.

Оношлогоо, биотехнологийн зорилгоор аденогипофизын дааврын бэлдмэлийн иммуномикроализын багцыг үйлдвэрлэх, ашиглах, төрөл бүрийн масштабтай стандартчилагдсан эсрэгбие үйлдвэрлэх, STHch-ийн шинэ бэлдмэл, түүний дотор иммобилизацийг бий болгох шаардлагатай байна.

STH нь уураг, өөх тос, эрдэс бодисын солилцоонд нөлөөлдөг, эсийн түвшинд зорилтот эрхтэнгүйгээр ажилладаг, анаболик шинж чанартай байдаг нь засварын процессыг идэвхжүүлж, янз бүрийн өвчнийг эмчлэхэд ашигладаг. Эдгээр асуудлыг илүү өргөн хүрээнд судлах, мөн STGch-ийн янз бүрийн өөрчлөгдсөн хэлбэр, хувилбаруудыг ашиглах нь нэн тулгамдсан бөгөөд ирээдүйтэй ажил юм.

Биотехнологид инсулин авах

Нойр булчирхайн Langerhans арлын пептид даавар болох инсулин нь чихрийн шижин өвчний гол эмчилгээ юм. Энэ өвчин нь инсулины дутагдлаас үүдэлтэй бөгөөд цусан дахь сахарын хэмжээ ихэссэнээр илэрдэг. Саяхан болтол инсулиныг бух, гахайн нойр булчирхайгаас гаргаж авсан.

Энэ эм нь хүний инсулинээс 1-3 амин хүчлийн орлуулалтаар ялгаатай байсан тул харшлын урвал, ялангуяа хүүхдүүдэд үзүүлэх аюул заналхийлж байжээ. Инсулины өргөн тархалттай эмчилгээний хэрэглээ нь өндөр өртөг, хязгаарлагдмал нөөцтэй тулгарсан.

Химийн өөрчлөлт хийснээр амьтдын инсулиныг хүнээс ялгах аргагүй болгосон боловч энэ нь бүтээгдэхүүний үнэ нэмэгдэхэд нөлөөлсөн гэсэн үг юм.

1982 оноос хойш EliLilly нь E. colie A ба B гинжин хэлхээний тусдаа синтез дээр үндэслэн генетикийн инженерийн инсулин үйлдвэрлэж байна. Бүтээгдэхүүний өртөг мэдэгдэхүйц буурч, үүнээс үүссэн инсулин нь хүнийхтэй адил юм. 1980 оноос хойш протеулиний генийг клонжуулах, хязгаарлагдмал протеолизаар боловсорсон дааврын урьдал болох тухай хэвлэлүүдээр гарч ирсэн.

Энкапсулацийн технологийг чихрийн шижин өвчний эмчилгээнд бас ашигладаг: капсул дахь нойр булчирхайн эсүүд, өвчтөний биед нэг удаа нэвтрэн орж, инсулин гаргадаг.

Нэгдсэн генетик нь фолликулыг өдөөдөг, лютеинжүүлдэг даавруудыг гаргалаа. Эдгээр пептидүүд нь хоёр дэд хэсгээс бүрдэнэ. Хэлэлцэх асуудалд мэдрэлийн системийн олигопептидын гормоны үйлдвэрлэлийн нийлэгжилт - 5 амин хүчлийн үлдэгдэлээс бүрдсэн энкефалин, морфины аналог болох эндорфин зэрэг орно.

Эдгээр пептидүүд оновчтой хэрэглэвэл өвдөлт намдаах, сэтгэлийн хөдөлгөөнийг сайжруулах, ажиллах чадварыг нэмэгдүүлэх, анхаарал төвлөрүүлэх, ой санамжийг сайжруулах, нойр, сэрүүн байдлыг бий болгодог.

Генийн инженерийн аргуудыг амжилттай хэрэгжүүлсэн жишээ бол өөр нэг пептид гормон болох сомомостатин дээр дээр дурдсан эрлийз уургийн технологийг ашиглан p-endorphin-ийн нийлэгжилт юм.

Хүний инсулин үйлдвэрлэх арга:

Түүхээс үзэхэд инсулиныг эмчилгээний зорилгоор олж авах анхны арга бол энэ дааврын аналогийг байгалийн эх үүсвэрээс (үхэр, гахайн нойр булчирхайн арлууд) тусгаарлах явдал юм.

Өнгөрсөн зууны 20-аад оны үед үхрийн мах, гахайн махны инсулин (бүтэц, амин хүчлийн дарааллаар хүний инсулинтай хамгийн ойр байдаг) нь хүний биед хүний инсулинтай харьцуулах үйл ажиллагаа явуулдаг болохыг тогтоожээ. Үүний дараа 1-р хэлбэрийн чихрийн шижинтэй өвчтөнүүдийг эмчлэхэд бух эсвэл гахайн инсулиныг удаан хугацаагаар хэрэглэсэн.

Гэсэн хэдий ч хэсэг хугацааны дараа зарим тохиолдолд үхрийн ба шаазан инсулины эсрэгбиемүүд хүний биед хуримтлагдаж эхэлдэг тул тэдгээрийн үр нөлөөг үгүйсгэдэг болохыг харуулсан.

Нөгөө талаар инсулин олж авах энэ аргын нэг давуу тал бол хүний инсулин үйлдвэрлэх анхны аргыг боловсруулахад шийдвэрлэх үүрэг гүйцэтгэсэн түүхий эд (үхрийн мах, гахайн махны инсулиныг их хэмжээгээр авах боломжтой) юм.Энэ аргыг хагас синтетик гэж нэрлэдэг.

Хүний инсулин үйлдвэрлэх энэ аргад гахайн инсулиныг тэжээлийн түүхий эд болгон ашигладаг байжээ. В гинжин хэлхээний C-терминалын октапептид нь цэвэршсэн шаазан инсулинээс ялгарч, дараа нь хүний инсулины С-терминал октапептид синтездэв.

Дараа нь химийн аргаар хавсаргаж, хамгаалалтын бүлгүүдийг арилгаж, улмаар инсулиныг цэвэршүүлэв. Инсулин олж авах энэ аргыг туршихад хүний инсулинд олж авсан дааврын бүрэн танилтыг харуулсан болно.

Энэ аргын гол сул тал нь үүссэн инсулины өндөр өртөг юм (одоо ч гэсэн октапептидийн химийн нийлэгжилт нь ялангуяа та үйлдвэрлэлийн хэмжээнд үнэтэй таашаал юм).

Одоогийн байдлаар хүний инсулиныг үндсэндээ хоёр аргаар авдаг: шаазан инсулиныг синтетик-ферментатив аргаар, генийн инженерчлэлийн аргаар өөрчлөх замаар.

Эхний тохиолдолд арга нь гаалийн инсулин нь Ala30Thr B гинжин хэлхээний C-терминал дээр нэг орлуулалтаар хүний инсулин ялгаатай байдаг.

Аланиныг треонинээр солих нь аланины энзим-катализаторын задралаар явагддаг бөгөөд үүний оронд карбоксийн бүлгээс хамгаалагдсан треонины үлдэгдлийг нэмж, урвалын хольцод их хэмжээгээр агуулдаг. Хамгаалалтын O-tert-butil бүлгийг задалсны дараа хүний инсулин гардаг.

Инсулин нь рекомбинант ДНХ технологийг ашиглан арилжааны зорилгоор олж авсан анхны уураг юм. Генетикийн аргаар боловсруулсан хүний инсулин үйлдвэрлэх хоёр үндсэн хандлага байдаг.

Эхний тохиолдолд молекулыг нугалах (дисульфидын гүүр үүсэх) ба изоформуудыг салгах замаар хоёр гинжийг тусад нь (үйлдвэрлэгчийн өөр өөр омог) авдаг.

Хоёрдугаарт, трепсин, карбоксептидаза В-ийн хамт дааврын идэвхтэй хэлбэрт шилжсэн ферментийн боловсруулалт (проинсулин) хэлбэрээр ордог.

Одоогийн байдлаар инсулиныг прекурсор хэлбэрээр авах нь илүү тохиромжтой бөгөөд энэ нь дисульфидын гүүрийг зөв хаах нөхцлийг бүрдүүлдэг (гинжийг тусад нь бэлтгэх, денатурацийг дараалсан цикл хийх, изоформыг салгах, сэлбэх үйл явцыг явуулдаг).

Хоёр аргачлалаар эхэлж буй бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг (A- ба B-gins эсвэл проинсулин), мөн эрлийз уургийн нэг хэсэг болгон авах боломжтой. А, В гинж эсвэл проинсулинээс гадна эрлийз уураг дараахь зүйлийг агуулж болно.

1) зөөгч уураг - эрлийз уураг эсийн перифлазмын орон зайд, соёлын орчинд тээвэрлэх,

2) хамаарлын бүрэлдэхүүн хэсэг - эрлийз уургийн тусгаарлалтыг ихээхэн хөнгөвчилдөг.

Энэ тохиолдолд эдгээр бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн аль аль нь эрлийз уургийн найрлагад нэгэн зэрэг оршиж болно. Үүнээс гадна, эрлийз уураг үүсгэх үед олон талт байдлын зарчмыг ашиглаж болно (өөрөөр хэлбэл, зорилтот полипептидийн хэд хэдэн хуулбарыг эрлийз уураг агуулдаг) бөгөөд энэ нь зорилтот бүтээгдэхүүний ургацыг мэдэгдэхүйц нэмэгдүүлэх боломжтой юм.

E. coli эсэд проинсулиныг илэрхийлнэ ..

Метионины үлдэгдэлээр дамжуулж N-терминалдаа холбосон шугаман просинулин ба уургийн фрагмент A-ийн Staphylococcus aureus-ээс бүрдэх уургийн уураг илэрхийлсэн нуклеотидын дарааллаар JM 109 N1864 омог ашигласан.

Рекомбинант омгийн эсүүдийн ханасан биомассыг тариалах нь эрлийз уураг үйлдвэрлэх эхлэлийг хангаж, тусгаарлалт, дараалсан хувиргах хоолойд инсулин үүсгэдэг.

Анион солилцооны давирхай ба RP (урвуу фаз) HPLC (ион солилцооны хроматографи) дээр ион солилцооны хроматографаар цэвэршүүлсэн проинсулиныг газрын зурагжуулах, масс спектрометрийн шинжилгээ хийх нь уугуул хүний проинсулины гульфидтэй тохирох дисульфидийн гүүр байгааг харуулж байна. Түүнчлэн прокариот эсүүдэд генетикийн инженерчлэлээр хүний инсулин үйлдвэрлэх шинэ, сайжруулсан аргыг боловсруулж хөгжүүлэх талаар мэдээлж байна. Зохиогчид үүссэн инсулин нь түүний бүтэц, биологийн идэвх нь нойр булчирхайгаас тусгаарлагдсан гормонтой ижил болохыг тогтоожээ.

Саяхан генийн инженерчлэлээр рекомбинант инсулин үйлдвэрлэх журмыг хялбаршуулахад ихээхэн анхаарал хандуулж байна. Ийнхүү лизиний үлдэгдэлээр дамжин өнгөрөх проинсулины N-терминалд хавсаргасан интерлейкины удирдагч пептидээс бүрдсэн уураг олж авсан. Уураг үр дүнтэй илэрхийлж, оруулах биед нутагшуулсан.

Тусгаарласны дараа уургийг трипсинээр шингээж, инсулин ба С-пептид үүсгэдэг. Судлаачдын өөр нэг бүлэг нь үүнтэй ижил арга хэмжээ авав. Проинсулин ба стафилококкийн хоёр нийлэг доминоос бүрдэх уураг нь IgG-ийг хооронд нь холбосон биед нэвтрүүлсэн боловч илэрхийлэл өндөр байв.

Уг уургийг IgG-ийн хамаарлын хроматографаар тусгаарлаж трипсин, карбоксептидаз В-ээр шингээж авсан. Инсулин ба С-пептидийг RP HPLC-ээр цэвэршүүлсэн. Хатсан бүтцийг бий болгоход зөөгч уураг ба зорилтот полипептидийн массын харьцаа маш их ач холбогдолтой байдаг.

Хүний ийлдэс дэх альбумин агуулсан уурагийг зөөгч полипептид болгон ашигладаг газарт хайлуулах байгууламж барихыг дүрсэлсэн болно. Үүнд нэг, гурав, долоон С-пептид хавсаргасан.

Arg32Tyr-ийг орлуулах мутант просинулин авах. Энэ уураг трипсин, карбоксептидаза В-тай хавсарч байх үед уугуул инсулин, тирозины үлдэгдэл агуулсан С-пептид үүссэн. Сүүлийнх нь 125I гэсэн тэмдэглэгээ хийсний дараа радиоиммуноассейд идэвхтэй ашиглагддаг.

Флюресцент инсулины деривативт онцгой анхаарал хандуулдаг. Уг бүтээлд зохиогчид хүний инсулины үйлдвэрлэлийн бүхий л үе шатанд бүтээгдэхүүнийг шинжлэхэд хроматографийн аргын хэрэглээ ба мэдээллийн талаар судалж, үр дүнд нь гарсан бүтээгдэхүүнийг үр дүнтэй ялгаж, шинжлэх зорилгоор хроматографийн үйл ажиллагааны хуваарийг гаргасан.

Инсулиныг тодорхойлохын тулд электрохимийн илрүүлэлт бүхий RP шингэн хроматографийг ашиглах боломжийн талаархи судалгааг мэдээлсэн бөгөөд Лангергантын арлаас тусгаарлагдсан инсулиныг иммунофосфатын хроматографаар спектрометрийн илрүүлэлтээр тодорхойлох аргачлал боловсруулжээ.

Уг ажилд капсулын электрофорезыг ашиглан лазер-флуоресцент илрүүлэгч ашиглан инсулиныг богино хугацаанд микро-тодорхойлох боломжийг судалж үзэв.Шинжилгээнд дээжинд фенилотиоцианат (FITC) гэсэн тодорхой хэмжээний инсулин болон моноклональ инсулины эсрэгбиемийн Fab фрагментийг нэмж оруулан гүйцэтгэдэг. Шошгон болон ердийн инсулинууд нь Fab цогцолбортой өрсөлдөх чадвартай байдаг. FITZ гэсэн шошготой инсулин ба түүний Fab-тай цогцолборыг 30 секундын дотор салгадаг.

Генийн инженерийн инсулин

Инсулин юунаас бүрддэг вэ гэдэг асуулт нь зөвхөн эмч, эм зүйчдэд төдийгүй чихрийн шижин өвчтэй өвчтөнүүд, түүнчлэн тэдний хамаатан садан, найз нөхдийн анхаарлыг татдаг.

Өнөөдөр хүний эрүүл мэндэд нэн чухал бөгөөд маш чухал гормоныг тусгайлан боловсруулсан, сайтар туршиж үзсэн технологи ашиглан төрөл бүрийн түүхий эдээс авах боломжтой. Бэлтгэх аргаас хамааран дараахь инсулиныг ялгана.

Амьтны гаралтай бүтээгдэхүүн гэж нэрлэдэг гахайн мах эсвэл үхрийн мах
Өөрчлөгдсөн биосинтетик гахай
Генетикийн хувьд боловсруулсан эсвэл рекомбинант
Генетикийн хувьд өөрчлөгдсөн
Синтетик

Гахайн махны инсулиныг чихрийн шижин өвчний үед хамгийн удаан хэрэглэсэн. Түүний хэрэглээ нь өнгөрсөн зууны 20-аад оноос эхэлсэн.

Гахайн мах эсвэл амьтан нь өнгөрсөн зууны 80-аад он хүртэл цорын ганц эм байсан гэдгийг тэмдэглэх нь зүйтэй. Үүнийг олж авахын тулд амьтны нойр булчирхайн эдийг хэрэглэдэг.

Гэсэн хэдий ч энэ аргыг оновчтой, энгийн гэж нэрлэх аргагүй юм: биологийн түүхий эдтэй ажиллах нь үргэлж тохиромжтой байдаггүй, түүхий эд нь өөрөө хангалттай биш юм.

Үүнээс гадна, шаазан инсулины найрлага нь эрүүл хүний үйлдвэрлэсэн гормоны найрлагатай бүрэн нийцдэггүй: тэдгээрийн бүтцэд янз бүрийн амин хүчлийн үлдэгдэл байдаг. Үхрийн нойр булчирхайгаас ялгарч буй даавар ялгаа нь илүү их байдаг тул үүнийг эерэг үзэгдэл гэж нэрлэх боломжгүй юм.

Ийм бэлтгэлд цэвэр олон бүрэлдэхүүн хэсгээс гадна орчин үеийн цэвэршүүлэх аргыг ашиглан салгах боломжгүй байдаг проинсулин гэж нэрлэгддэг бодисыг байнга агуулдаг. Тэр бол ихэнхдээ хүүхэд, ахмад настнуудад харшлын урвалын эх үүсвэр болдог.

Эмийн сангууд чихрийн шижинтэй хүмүүст бэлэн мөнгө авахыг дахин хүсч байна. Европын орчин үеийн мэдрэмжтэй эм байдаг, гэхдээ тэд энэ талаар чимээгүй байдаг. Айн? Аан, тэр ...

Ийм учраас дэлхийн эрдэмтэд амьтдын үйлдвэрлэсэн гормоны бүтцийг эрүүл хүний нойр булчирхайн гормонтой бүрэн нийцүүлэхийг эртнээс сонирхож ирсэн. Чихрийн шижин өвчнийг эмчлэх, эмчлэх бодит нээлт бол амьтны бэлдмэлд агуулагдах амин хүчил аланиныг треонинтэй сольж олж авсан хагас синтетик эм үйлдвэрлэх явдал байв.

Үүний зэрэгцээ, даавар үйлдвэрлэх хагас синтетик арга нь амьтны бэлдмэлийг ашиглахад үндэслэдэг. Өөрөөр хэлбэл, тэд зүгээр л өөрчлөгдөж, хүний үйлдвэрлэсэн гормонуудтай ижил төстэй болдог. Тэдний давуу талуудын нэг бол хүний биед нийцэх байдал, харшлын урвал байхгүй байх явдал юм.

Энэ аргын сул талууд нь түүхий эд материалын хомсдол, биологийн материалтай ажиллахад бэрхшээлтэй байдал, түүнчлэн технологи өөрөө болон үүнээс үүдэлтэй эмийн өртөг зэрэг орно.

Үүнтэй холбогдуулан чихрийн шижин өвчнийг эмчлэхэд хамгийн тохиромжтой эм бол генийн инженерчлэлээр олж авсан рекомбинант инсулин юм.

Дашрамд дурдахад үүнийг генийн аргаар боловсруулсан инсулин гэж нэрлэдэг бөгөөд үүнийг олж авах аргыг зааж өгдөг бөгөөд үүнээс үүссэн бүтээгдэхүүнийг хүний инсулин гэж нэрлэдэг бөгөөд ингэснээр эрүүл хүний нойр булчирхайгаар үүсгэгддэг гормонуудад түүний үнэмлэхүй шинж чанарыг онцолж өгдөг.

Генетик инженерийн инсулины давуу талуудын нэг нь түүний өндөр цэвэршилт, проинсулин дутагдалтай байдгаас гадна харшлын урвал үүсгэдэггүй, эсрэг заалтгүй байдаг.

Байнга асуудаг асуулт нь ойлгомжтой байдаг: рекомбинант инсулин яг юунаас бүрддэг вэ? Энэ дааврыг мөөгөнцрийн омог, мөн шим тэжээлийн тусгай орчинд байрлуулсан Escherichia coli үйлдвэрлэдэг гэсэн үг юм. Түүнээс гадна олж авсан бодисын хэмжээ маш их байгаа тул амьтны эд эрхтнээс авсан эмийг хэрэглэхээс бүрэн татгалзах боломжтой юм.

Мэдээжийн хэрэг, энэ нь энгийн E. coli-ийн тухай биш, генээр өөрчлөгдсөн, хүний генийн аргаар боловсруулсан инсулин үйлдвэрлэх чадвартай бөгөөд найрлага, шинж чанар нь эрүүл хүний нойр булчирхайн эсийн үйлдвэрлэсэн гормонтой яг ижил юм.

Генийн инженерийн инсулины давуу тал нь түүний хүний гормонтой туйлын төстэй байдал төдийгүй бэлтгэлийн хялбар байдал, хангалттай хэмжээний түүхий эд, боломжийн өртөг юм.

Дэлхийн эрдэмтэд рекомбинант инсулины үйлдвэрлэлийг чихрийн шижин өвчний эмчилгээний шинэ нээлт гэж нэрлэжээ. Энэхүү нээлтийн ач холбогдол нь маш том бөгөөд ач холбогдолтой тул үүнийг хэт үнэлэхэд хэцүү байдаг.

Өнөөдөр энэхүү гормоны хэрэгцээний бараг 95% нь генийн инженерийн инсулинаар хангагддаг гэдгийг тэмдэглэхэд хялбар юм.

Үүний зэрэгцээ, өмнө нь харшилтай байсан олон мянган хүмүүс хэвийн амьдралд амьдрах боломжийг олж авсан.

Би 31 жилийн турш чихрийн шижин өвчтэй байсан. Тэр одоо эрүүл болсон. Гэхдээ эдгээр капсулууд нь энгийн хүмүүст хүртээмжтэй биш, эмийн сан зарахыг хүсэхгүй байгаа нь тэдэнд ашиггүй юм.

Хүний инженерийн инсулин хэрхэн ажилладаг

1-р хэлбэрийн чихрийн шижин өвчнийг эмчлэхэд хүний генийн инженерийн хоёр фазын инсулин хэрэглэдэг. Эмийн санд энэ нь уусмал хэлбэрээр зарагддаг бөгөөд "Хайртай" гэсэн тэмдэгтэй байдаг. Хоёр дахь төрлийн өвчнийг эмчийн зааж өгсөн эм нь чихрийн шижинтэй хүмүүст тохирохгүй бол ийм эмээр эмчилж болно.

Генетикийн аргаар боловсруулсан инсулиныг хэрэв хүн чихрийн шижинтэй коматай бол хэрэглэдэг. Эмч нар чихрийн шижин өвчтэй гэж оношлогдсон жирэмсэн эмэгтэйчүүдэд элсэн чихэр бууруулах эм, эмчилгээний хоолны дэглэм тус болохгүй.

Ерөнхийдөө генетикийн аргаар боловсруулсан инсулин эсвэл GMO-ийг хүүхэд төрөх үед, мэс засал хийлгэх, эсвэл чихрийн шижин өвчнөөр хүнд гэмтэл авсан тохиолдолд хэрэглэдэг. Мансууруулах бодис нь хурдан ажилладаг гормоны хэрэглээнд аюулгүй шилжих боломжийг олгодог.

Инсулины бифасик хүний генийн инженерчлэлийг ашиглахын өмнө шинжилгээ хийж, энэ эм нь өвчтөнд тохирох эсэхийг олж мэдэх шаардлагатай. Хэрэв чихрийн шижин өвчтэй хүн гипогликеми илэрвэл эмийг хэрэглэхийг зөвлөдөггүй.
Уусмалын үйл ажиллагааны схем нь генийн инженерийн инсулин нь эсүүдтэй харилцан үйлчилдэг бөгөөд энэ нь цогцолбор үүсэхэд хүргэдэг. Эдгээр цогцолборууд руу ороход эсүүд өдөөгдөж, илүү идэвхтэй ажиллаж эхэлдэг. Үүний үр дүнд илүү олон фермент үйлдвэрлэгддэг.
Энэ процесст глюкоз илүү хурдан шингэж, бие махбодид орж буй нүүрс ус идэвхтэй боловсруулагддаг. Ийнхүү элэг нь глюкозыг илүү удаан ялгаруулж, уураг илүү хурдан шингээж авах болно.

Мансууруулах бодисын үйл ажиллагааны зарчим нь тун, инсулины хэлбэр, тарилгын талбай сонгох зэргээс хамаарна. Аливаа процедурыг зөвхөн ирж буй эмчтэй тохиролцсоны дараа л хийх ёстой. Эхний тарилга нь эмчийн хяналтан дор хийгддэг.

Мансууруулах бодис хэрэглэх зөвлөмж

Хүний генетик инженерчлэл буюу инсулин нь өөр өөр худалдааны нэртэй байдаг. Түүнчлэн, дааврын бэлдмэл нь үйл ажиллагааны үргэлжлэх хугацаа, уусмал бэлтгэх аргаас хамааран өөр өөр байж болно. Бүтээгдэхүүнийг инсулины төрлөөс хамаарч нэрлэв.

Генетикийн аргаар боловсруулсан инсулинууд нь Humudar, Vozulim, Actrapid зэрэг эмийн нэг хэсэг юм. Инсуран, Генсулин. Энэ бол ийм эмийн бүрэн жагсаалт биш бөгөөд тэдний тоо нэлээд их байна.

Дээр дурдсан бүх эм нь бие махбодид үзүүлэх нөлөөллөөс хамааран өөр өөр байдаг.GMO нь хэдэн цаг үргэлжилж, эсвэл бүтэн өдрийн турш идэвхтэй байж чаддаг.

Хоёр фазын хосолсон эм нь эмэнд өртөх хугацааг өөрчилдөг тодорхой бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг агуулсан эмийг агуулдаг.

Ийм эмийг холимог хэлбэрээр зардаг бөгөөд үүнд генетикийн аргаар олж авсан гормонууд багтдаг.
Эдгээр сангуудад Mikstard, Insuman, Gansulin, Gensulin орно.
Мансууруулах бодисыг өдөрт хоёр удаа, хоолны өмнө хагас цагийн турш хэрэглэдэг. Гормон нь хоол хүнс хэрэглэх хугацаатай шууд холбоотой тул ийм системийг чанд баримтлах хэрэгтэй.

Хүний генийг үйлдвэрлэхэд дунджаар өртөх хугацаатай байдаг.

Уусмал нь 60 минутын дотор хүчин төгөлдөр болох боловч тарилснаас хойш зургаагаас долоон цагийн дараа хамгийн их идэвхжсэн мөч ажиглагддаг.
Эм нь 12 цагийн дараа биеэс бүрэн гардаг.
Ийм эмэнд Insuran, Insuman, Protafan, Rinsulin, Biosulin орно.

Бие махбодид богино хугацаагаар өртдөг ГМО байдаг. Эдгээрт инсулины Actrapid, Гансулин, Хумулин, Инсуран, Ринсулин, Биоусулин зэрэг эмүүд орно. Ийм инсулинууд хоёроос гурван цагийн дараа идэвхтэй үе шаттай байдаг ба эмийн эхний шинж тэмдгүүд тарилга хийснээс хойш хагас цагийн дараа ажиглагддаг.

Инсулиныг хэрэглэхээс өмнө GMO-ийн тунгалаг байдал, шингэн дэх гадны бодис байхгүй эсэхийг шалгаж үзэх шаардлагатай. Хэрэв анагаах ухаанд гадны бодис илэрсэн, булингартай, хур тунадас орсон бол лакыг хаях хэрэгтэй - эм хэрэглэхэд тохиромжгүй болно.

Хэрэглэсэн инсулин нь өрөөний температурт байх ёстой. Хэрэв чихрийн шижинтэй хүн халдварт өвчин, бамбай булчирхайн дисфункци, Аддисоны өвчин, гипопититаризм, бөөрний архаг өвчтэй бол дааврын тунг тохируулах шаардлагатай.

Хоолны дэглэмийг алгасах эсвэл бие махбодийн хэт ачааллаас болж шинэ төрлийн инсулин руу шилжих тохиолдолд гипогликемийн дайралт нь хэтрүүлэн хэрэглэснээр боломжтой байдаг. Түүнчлэн алдаа нь дааврын хэрэгцээг бууруулдаг өвчин байж болно - хүнд хэлбэрийн бөөр, элэгний өвчин, бамбай булчирхай, адренал кортекс, гипофиз булчирхай.

Цусан дахь сахарын хэмжээ огцом буурах нь тарилгын талбайн өөрчлөлттэй холбоотой юм. Тиймээс нэг төрлийн инсулиныг үндэслэлтэйгээр шилжүүлэх шаардлагатай бөгөөд зөвхөн ирж буй эмчтэй тохиролцсоны дараа л хийх ёстой.
Хэрэв чихрийн шижин өвчтэй хүн богино хугацаанд инсулин хэрэглэдэг бол тарилгын талбайд өөхний эд эсийн хэмжээ буурч, эсвэл эсрэгээр нэмэгддэг. Үүнээс урьдчилан сэргийлэхийн тулд тарилгыг өөр өөр газарт хийх шаардлагатай.

Жирэмсэн эмэгтэйчүүд жирэмсний янз бүрийн хугацаанд инсулины хэмжээ өөр өөр байж болохыг мэддэг байх ёстой. Үүнийг хийхийн тулд та өдөр бүр цусан дахь сахарын шинжилгээг глюкометрээр хийх хэрэгтэй.

Хүний биед үзүүлэх инсулины үйл ажиллагааг энэ нийтлэл дэх видеонд нарийвчлан тайлбарласан болно.

1. Инсулины бүтэц ба үүрэг 5

1.1. Инсулины молекулын бүтэц 5

1.2. Инсулины биологийн ач холбогдол 7

1.3. Инсулины биосинтез 8

2. Генийн инженерийн инсулины синтез 10

2.1. Эмийн синтезийн генийн инженерийн аргыг ашиглах нь 10

2.2. Генийн инженерийн аргууд 11

2.3. Генийн инженерийн инсулины үйлдвэрлэл 14

Дүгнэлт 18

Илүүдэл жингийн шинж тэмдэг

Инсулин хэрэглэх үед эмчийн зөвлөмжийг дагаж, тогтоосон эмийн зөв тунг ажиглах нь чухал юм.

Дүрэм журмыг дагаж мөрдөхгүй, хэтрүүлэн хэрэглэвэл чихрийн шижин өвчтэй хүн толгой өвдөх, хавагнах, өлсөх, хөлрөх, зүрхний цохилт өгөх зэрэг шинж тэмдгүүд илэрч байвал хүн хэт их ачаалалтай, уур уцаартай болдог. Бүх бие махбодид чичрэх, чичрэх зэрэг шинж тэмдгүүд ажиглагдаж болно.

Ийм шинж тэмдэг нь цусан дахь сахарын хэмжээ буурах шинж тэмдгүүдтэй маш төстэй байдаг.Бага зэргийн шинж тэмдгийн үе шатанд чихрийн шижин өвчтэй хүн бие даан асуудлыг шийдэж, нөхцөл байдлыг сайжруулж чадна. Үүнийг хийхийн тулд чихэр эсвэл чихэр агуулсан бусад чихэрлэг бүтээгдэхүүнийг идээрэй.

Хэрэв чихрийн шижингийн кома гарвал декстрозын уусмал хэрэглэдэг бол эмийг хүн ухаан алдах хүртэл судсаар хийдэг. Эхний сэжигтэй шинж тэмдгүүд илрэх тохиолдолд түргэн тусламж дуудах шаардлагатай бөгөөд энэ нь түргэн тусламжийн аргаар өвчтөний амьдралыг авчрах боломжтой болно.
GMO-г хэрэглэсний дараа гаж нөлөө үзүүлснээр хүн чонон хөрвөсний хэлбэрээр арьс дээр тууралт гарч, биеийн хэсэг нь хавдаж, цусны даралт огцом буурч, загатнах, амьсгал давчдах зэрэг шинж тэмдгүүд илэрдэг. Энэ бол эмэнд харшлын урвал бөгөөд хэсэг хугацааны дараа өөрөө алга болдог. Хэрэв байдал үргэлжилсээр байвал эмчид хандана уу.
Чихрийн шижинтэй хүмүүст инсулины бэлдмэл хэрэглэснээс хойш эхний өдрүүдэд бие нь шингэн алдаж, хүн шингэний дутагдалд ордог, хоолны дуршил муудах, гар, хөлөнд хавагнах, байнгын нойрмоглох мэдрэмж мэдрэгддэг. Ийм шинж тэмдэг ихэвчлэн хурдан өнгөрч, дахин давтагдахгүй.

Шүүмж, сэтгэгдэл

Би 2-р хэлбэрийн чихрийн шижинтэй - инсулин хамаардаггүй. Найз нь DiabeNot-тай цусан дахь сахарын хэмжээг бууруулахыг зөвлөж байна. Би интернетээр захиалсан. Хүлээн авалт эхэллээ.

Би хатуу чанга биш хоолны дэглэм баримталдаг тул өглөө бүр 2-3 км алхаж эхлэв. Сүүлийн хоёр долоо хоногт би өглөөний 9.3-аас 7.1, тэр байтугай 6-ны өглөө өглөө хэмжигч чихрийн хэмжээ жигд буурч байгааг анзаарч байна.

1! Би урьдчилан сэргийлэх сургалтыг үргэлжлүүлж байна. Би амжилтын талаар цуцлах болно.

Маргарита Павловна, би одоо Дибенот дээр сууж байна. SD 2. Надад үнэхээр хоолны дэглэм, алхах цаг байдаггүй, гэхдээ би чихэр, нүүрс ус хэрэглэдэггүй, XE гэж боддог, гэхдээ наснаас хамааран элсэн чихэр их хэвээр байна.

Үр дүн нь таных шиг сайн биш боловч 7.0 ширхэг сахар долоо хоногт гарахгүй. Та чихрийн хэмжээг ямар глюкометрээр хэмждэг вэ? Тэр танд плазм эсвэл бүхэл бүтэн цусыг харуулж байна уу? Мансууруулах бодис хэрэглэснээс үр дүнг харьцуулахыг хүсч байна.

Ийм мэдээлэлтэй нийтлэлд маш их баярлалаа.

Генийн инженерийн инсулины үйлдвэрлэл

Хүн эрүүл байхын тулд бие махбод дахь инсулины түвшинг хянах хэрэгтэй. Энэ гормон хангалттай байх ёстой бөгөөд ингэснээр цусан дахь глюкоз хуримтлагдахгүй. Үгүй бол бодисын солилцооны эмгэгийн үед эмч чихрийн шижин өвчнийг оношлодог.

Чихрийн шижин өвчний ахисан шатны эмчилгээ нь бие махбодийн гарал үүсэлгүйгээр үүсгэгддэг инсулины концентрацийг нөхөх явдал юм. Үүний тулд уусдаг инсулиныг ашигладаг бөгөөд энэ нь хүний генийн инженерчлэлтэй төстэй байдаг. Нойр булчирхай нь ийм даавар үйлдвэрлэх үүрэгтэй.

Инсулин үйлдвэрлэхэд зөвхөн байгалийн даавар үйлдвэрлэх технологийг ашигладаг төдийгүй үйлдвэрлэгчид зохиомлоор олж авсан өөрчлөгдсөн инсулиныг ашигладаг. "Solubilis" гэж тэмдэглэсэн эмийг уусдаг гэж заасан байдаг.

Эмийн төрөл

Дээр дурдсан бүх эм нь бие махбодид үзүүлэх нөлөөллөөс хамааран өөр өөр байдаг. GMO нь хэдэн цаг үргэлжилж, эсвэл бүтэн өдрийн турш идэвхтэй байж чаддаг.

Ийм эмийг холимог хэлбэрээр зардаг бөгөөд үүнд генетикийн аргаар олж авсан гормонууд багтдаг.
Эдгээр сангуудад Mikstard, Insuman, Gansulin, Gensulin орно.
Мансууруулах бодисыг өдөрт хоёр удаа, хоолны өмнө хагас цагийн турш хэрэглэдэг. Гормон нь хоол хүнс хэрэглэх хугацаатай шууд холбоотой тул ийм системийг чанд баримтлах хэрэгтэй.

Хүний генийг үйлдвэрлэхэд дунджаар өртөх хугацаатай байдаг.

Уусмал нь 60 минутын дотор хүчин төгөлдөр болох боловч тарилснаас хойш зургаагаас долоон цагийн дараа хамгийн их идэвхжсэн мөч ажиглагддаг.
Эм нь 12 цагийн дараа биеэс бүрэн гардаг.
Ийм эмэнд Insuran, Insuman, Protafan, Rinsulin, Biosulin орно.

Ийм эмийг зургаан цагийн дараа бүрэн гадагшлуулдаг.

Чихрийн шижин өвчний генетикийн аргаар боловсруулсан хүний инсулин хэрэглэх

Хүний генетикийн аргаар боловсруулсан инсулин нь нойр булчирхайг үүсгэдэг инсулины нийтлэг даавар орлуулагч юм.

Хүний генетикийн хувьд өөрчлөгдсөн хүний дааврыг синтез хийхэд ашигладаг төдийгүй синтетик аргаар бий болгосон бодис юм. Эмийг бий болгох өөр нэг алдартай сонголт бол өөрчлөгдсөн гахайн инсулин ашиглах явдал юм, учир нь

найрлага, чиг үүргээрээ хүний хувьд хамгийн ойр байдаг.

Генийн инженерийн инсулин үйлдвэрлэх хуваарь.

Заалт ба эсрэг заалтууд

Генетикийн аргаар боловсруулсан инсулиныг 1-р хэлбэрийн чихрийн шижин, 2-р хэлбэрийн чихрийн шижин өвчний үед гипогликемийн шинж чанартай аман эмэнд тогтвортой хариу урвал ажиглагдах боломжтой.

Өвчтөн тодорхой төрлийн команд орсон тохиолдолд үүнийг ашиглаж болно. Жирэмсэн эмэгтэй чихрийн шижинтэй болж эхэлж байгаа бол инженерийн инсулин хэрэглэхийг зөвшөөрдөг боловч хоолны дэглэм нь глюкозын түвшинд нөлөөлөхгүй тохиолдолд л хэрэглэнэ. Гипертерми ажиглагдаж болох халдвартай тохиолдолд түүний хэрэглээг зөвлөж байна.

Генийн бэлдмэл нь хүүхэд төрүүлэх, үйл ажиллагаа, гэмтэл, бодисын солилцооны эмгэг, удаан хугацааны инсулин руу аажмаар шилжих үед амжилттай хэрэглэгддэг.

Гормоны бэлдмэлийг эмийн зарим элементүүдэд хэт мэдрэг, гипогликемийн орлуулах эм бэлдмэл хэрэглэхийг хориглоно.

Эмийн фармакологийн үйлдэл

Энэ төрлийн мансууруулах бодис нь эсийн мембраны тодорхой рецепторуудтай урвалд орж тэдгээрийн хамт цогцолбор үүсгэдэг. Энэ нь эсэд ороход эмийн цогцолбор нь ажилд нөлөөлж, түүнийг илүү идэвхтэй болгож, нэмэлт фермент үйлдвэрлэхийг өдөөдөг.

Глюкозын түвшин буурч, эсүүд илүү хурдан боловсруулагддаг. Үүний дараа липогенез, уургийн үйлдвэрлэл хурдасч, глюкоз үүсэх элэгний хурд буурдаг.

Мансууруулах бодисын үргэлжлэх хугацаа тарилгын талбай, эмийн төрөл, тун, хүний биед үзүүлэх хариу урвалаас хамаарна. Зөвхөн эмч л энэ бүлэгт тодорхой тунг тогтоож, тодорхой эмийг зааж өгч болно. Мансууруулах бодис хэрэглэх эхний үе шатанд өвчтөн эмийг татгалзсан эсэхийг мэдэхийн тулд эмч нарыг сайтар хянаж байдаг.

Генетикийн инженерчлэгдсэн хүний инсулин эмийн жишээ

Хүний генетикийн аргаар боловсруулсан инсулин нь Insuran, Insuman, Vozulim, Penfill, Biosulin, Gensulin, Actrapid, Rinsulin, Humulin, Humudar, Rosinsulin болон бусад алдартай эмүүдэд агуулагддаг.

Олон төрлийн инсулин байдаг.Ангиллын нэг нь эмийн үргэлжлэх хугацаатай холбоотой юм. Түүний хэлснээр уусдаг инсулин нь богино, урт үйлдэлтэй байдаг. Энэ эм нь түргэн бөгөөд удаан хугацаанд үйлчилдэг бодисыг агуулсан хавсарсан эм (бифасик инсулин) байдаг.

Энэ төрлийн эмийг холимог гэж нэрлэдэг. Тэдгээрийн дотроос хүний дааврын өөрчлөлтөөс үүдэлтэй байдаг. Хоёр фазын инсулин нь Mikstard, Gansulin, Insuman, Humulin, Gensulin юм. Тэд өдөрт хоёр удаа, хоолны өмнө хагас цагийн турш хэрэглэх шаардлагатай.

Энэ нь хоёр фазын инсулин нь богино хугацааны нөлөөтэй бодис агуулдагтай холбоотой бөгөөд түүний хэрэглээ нь хоолны дэглэмээс хамаардаг.

Хүний гормоны инженерийн аналог нь дундаж хугацаагаар хэрэглэдэг эмүүдийн дунд ордог. Энэхүү уусдаг инсулин нэг цагийн дараа үйл ажиллагаагаа явуулж эхэлдэг бөгөөд түүний үйл ажиллагааны оргил үе 7 цагийн дараа тохиолддог. 12 цагийн дараа дэлгэц дээр гарч ирнэ. Энэ бүлгийн хүний генетикийн аргаар боловсруулсан эм бол Insuman, Protafan, Humulin, Rinsulin, Biosulin, Gensulin, Gansulin, Insuran юм.

Бүлгийн дунд хүний генетикийн хувьд боловсруулсан эм байдаг. Жишээлбэл, эдгээр нь Гансулин, Инсуран, Хумулин, Ринсулин, Генсулин, Биоусулин ба Актрапид юм. Ийм уусдаг инсулин хагас цагийн дараа идэвхжиж эхэлдэг бөгөөд түүний үйл ажиллагаа хэдхэн цагийн дотор хамгийн дээд хэмжээндээ хүрдэг. Ийм эмийг 6 цагийн турш гадагшлуулдаг.

Генетикийн аргаар боловсруулсан инсулинтай эм хэтрүүлэн хэрэглэвэл сул дорой байдал, нойрмоглох, ядрах, цочромтгой болох, жихүүдэсэх, хүйтэн хөлс ялгарах хэмжээ ихсэх, чичрэх, хөндүүрлэх, зүрх дэлсэх, толгой өвдөх, хавагнах, өлсөх зэрэг шинж тэмдэг илэрдэг. Энэ бүхэн нь гипогликемийн шинж тэмдэг юм.

Хэрэв энэ өвчин дөнгөж эхэлж, эрт, илүү хялбар үе шатанд байгаа бол та бүх шинж тэмдгийг өөрөө арилгах боломжтой. Үүнийг хийхийн тулд элсэн чихэр, нүүрс ус ихтэй хоол хүнс идэх хэрэгтэй бөгөөд үүнийг амархан шингээж авах боломжтой. Глюкагон ба декстрозын уусмалыг биед нэвтрүүлж болно.

Хэрэв хүн комад унасан бол нөхцөл байдал сайжрах хүртэл та декстроцын өөрчлөгдсөн уусмалыг тараах хэрэгтэй.

Зарим хүмүүс инсулинтэй генийн өөрчлөлттэй эм хэрэглэхэд харшлын урвал үүсгэж болзошгүй. Шинж тэмдэг нь хонхорхой, хавдах, хүч чадал алдах, цусны даралт буурах, амьсгал давчдах, тууралт гарах, халуурах, загатнах зэрэг шинж тэмдгүүд орно.

Зарим тохиолдолд гипогликеми ба кома тохиолддог. Хүний ухамсартай холбоотой асуудал, тэр ч байтугай кома үүсч болно. Хэрэв өвчтөн эм уухгүй бол гипергликеми үүсч болзошгүй юм.

Энэ нь бага тунгаар, бие махбодид халдварт үзэгдлүүд үүсэх, мөн хоолны дэглэмийг дагаж мөрдөхгүй байхтай холбоотой юм.

Зарим тохиолдолд өвчтөн эмийг хэрэглэсэн газарт липодистрофи үүсч болно.

Мансууруулах бодис хэрэглэж эхлэхэд цэврүүтэх, усны хомсдол, нойрмоглох, хоолны дуршил буурах зэрэг шинж тэмдэг илэрч болно. Гэхдээ эдгээр үзэгдэл нь түр зуурын шинжтэй байдаг.

Генетикийн аргаар боловсруулсан бодис гэх мэт байгалийн инсулин орлуулагчийг ашиглах нь чихрийн шижингийн эмчилгээнд маш сайн нэмэлт болдог.

Энэ нь глюкозыг эсүүд илүү ихээр шингээж, тээвэрлэх үйл явц өөрчлөгдөж байдаг тул элсэн чихрийн түвшинг бууруулахад тусалдаг. Гэхдээ эдгээр эмийг эмчийн зааврын дагуу хатуу хэрэглэх шаардлагатай, учир нь

энэ нь өвчтөний хүсээгүй эрүүл мэндэд нөлөөлж болзошгүй юм.

Инсулин юунаас бүрддэг вэ?

Инсулин бол 1-р хэлбэрийн чихрийн шижингийн эмчилгээний гол эм юм. Заримдаа энэ нь өвчний хоёр дахь хэлбэрийн үед өвчтөнийг тогтворжуулах, түүний сайн сайхан байдлыг сайжруулахад ашиглагддаг. Энэ бодис нь шинж чанараараа бага тунгаар нүүрс усны солилцоонд нөлөөлөх чадвартай даавар юм.

Ер нь нойр булчирхай нь хангалттай хэмжээний инсулин гаргадаг бөгөөд энэ нь цусан дахь сахарын физиологийн түвшинг хадгалахад тусалдаг. Гэхдээ дотоод шүүрлийн ноцтой эмгэгийн үед өвчтөнд ихэвчлэн туслах цорын ганц боломж бол яг инсулины тарилга юм.

Харамсалтай нь хоол боловсруулах замд бүрэн устаж биологийн үнэ цэнээ алддаг тул үүнийг амаар (шахмал хэлбэрээр) авах боломжгүй юм.

Амьтны гаралтай түүхий эдээс бэлтгэсэн бэлдмэл

Гахай, үхрийн нойр булчирхайгаас энэ дааврыг олж авах нь өнөө үед ховор хэрэглэгддэг хуучин технологи юм.

Энэ нь хүлээн авсан эмийн чанар муу, харшлын урвал үүсгэх хандлага, хангалтгүй цэвэршилттэй холбоотой юм.

Баримт нь даавар нь уургийн бодис учраас амин хүчлийн тодорхой багцаас бүрддэг.

Гахайн биед үйлдвэрлэсэн инсулин нь хүний хүчлийн амин хүчлийн найрлагад 1 амин хүчил, үхрийн нүдний инсулин 3-аар ялгаатай байдаг.

20-р зууны эхэн ба дунд үед ижил төстэй эм байхгүй байсан үед ийм инсулин нь анагаах ухаанд шинэ нээлт болж, чихрийн шижин өвчтнүүдийн эмчилгээг шинэ түвшинд аваачсан юм. Энэ аргаар олж авсан гормонууд нь цусан дахь сахарын хэмжээг бууруулдаг боловч гаж нөлөө, харшил үүсгэдэг.

Анагаах ухаанд агуулагдах амин хүчил, хольцын найрлага дахь ялгаа нь өвчтөнүүдийн нөхцөл байдалд, ялангуяа эмзэг бүлгийн өвчтөнүүдэд (хүүхэд, ахмад настнууд) нөлөөлж байв.

Ийм инсулиныг хүлцэл муутай байгаагийн бас нэг шалтгаан нь эмэнд түүний идэвхтэй урьдал нөхцөл байдал (проинсулин) байгаа нь энэ эмийн өөрчлөлтөөс ангижрах боломжгүй байсан юм.

Өнөө үед эдгээр дутагдлыг үл харуулсан дэвшилтэт гахайн махны инсулинууд байдаг. Тэдгээрийг гахайн нойр булчирхайгаас авдаг боловч дараа нь нэмэлт боловсруулалт, цэвэршүүлэлтэд оруулдаг. Эдгээр нь олон бүрэлдэхүүн хэсэг бөгөөд нэмэлт бодис агуулдаг.

Өөрчлөгдсөн гахайн махны инсулин нь хүний гормоноос бараг ялгаагүй тул практикт ашиглагдсаар байна

Ийм эмийг өвчтөнүүд илүү сайн тэсвэрлэдэг бөгөөд практикт сөрөг урвал үүсгэдэггүй, дархлааг бууруулдаггүй, цусан дахь сахарын хэмжээг бууруулдаг. Үхрийн инсулин нь өнөө үед анагаах ухаанд хэрэглэгддэггүй, учир нь гадны бүтэц нь хүний биеийн дархлаа болон бусад тогтолцоонд сөргөөр нөлөөлдөг.

Генийн инженерийн инсулин

Чихрийн шижин өвчний үед хэрэглэдэг хүний инсулиныг аж үйлдвэрийн хэмжээгээр хоёр аргаар авдаг.

Инсулин хадгалах нөхцөл

сүвэрхэг инсулинийг ферментийн аргаар хийдэг.
генетикийн хувьд өөрчлөгдсөн омирчичи коли эсвэл мөөгөнцрийн омгийг ашиглан.

Физик-химийн өөрчлөлтөөс үүдэн тусгай ферментийн нөлөөн дор шаазан инсулины молекулууд хүний инсулинтай ижил болдог. Үүссэн бэлдмэлийн амин хүчлийн найрлага нь хүний биед үйлдвэрлэсэн байгалийн гормоны найрлагаас ялгаатай биш юм.

Үйлдвэрлэлийн явцад эм нь өндөр цэвэршилттэй тул харшлын урвал эсвэл бусад хүсээгүй илрэл үүсгэдэггүй.

Гэхдээ ихэвчлэн инсулиныг өөрчлөгдсөн (генетикийн хувьд өөрчлөгдсөн) бичил биетний тусламжтайгаар олж авдаг. Биотехнологийн аргыг хэрэглэснээр нян эсвэл мөөгөнцөр нь өөрсдийгөө инсулин үүсгэдэг байдлаар өөрчилдөг.

Инсулин үйлдвэрлэхээс гадна түүний цэвэршилт нь чухал үүрэг гүйцэтгэдэг. Энэ эм нь харшлын болон үрэвслийн урвал үүсгэхгүй байхын тулд үе шат бүрт бичил биетний омгийн цэвэршилт, бүх уусмал, түүнчлэн ашигласан найрлагад хяналт тавих шаардлагатай байдаг.

Ийм инсулин үйлдвэрлэх 2 арга байдаг. Тэдгээрийн эхнийх нь нэг бичил биетний хоёр өөр омгийг (зүйл) ашиглахад суурилдаг.

Тэдгээр нь гормоны ДНХ молекулын зөвхөн нэг гинжийг синтезлэдэг (тэдгээрийн зөвхөн хоёр нь байдаг ба тэд хоорондоо спираль хэлбэртэй байдаг).

Дараа нь эдгээр гинжүүд хоорондоо холбогддог бөгөөд үүний үр дүнд уусмалд инсулины идэвхтэй хэлбэрийг ямар ч биологийн ач холбогдолгүй байдлаас салгах боломжтой болно.

Escherichia coli эсвэл мөөгөнцрийн тусламжтайгаар эмийг авах хоёр дахь арга бол микроб нь эхлээд идэвхгүй инсулин (өөрөөр хэлбэл түүний өмнөх проинсулин) үүсгэдэг явдал юм. Дараа нь фермент эмчилгээг ашиглан энэ хэлбэрийг идэвхжүүлж анагаах ухаанд ашигладаг.

Тодорхой үйлдвэрлэлийн байгууламжид нэвтрэх боломжтой ажилтнууд ариутгасан хамгаалалтын костюм өмсөж байх ёстой бөгөөд энэ нь эмийн хүний биологийн шингэнтэй холбоо тогтоох явдлыг арилгадаг.

Эдгээр бүх процессууд нь ихэвчлэн автоматжуулсан, агаар, ампул, лонхтой холбогдсон бүх гадаргуу нь ариутгасан, тоног төхөөрөмжтэй шугамууд нь герметик битүүмжлэгдсэн байдаг.

Биотехнологийн арга нь эрдэмтэд чихрийн шижин өвчний өөр шийдлийн талаар бодох боломжийг олгодог.

Жишээлбэл, өнөөдрийг хүртэл генийн инженерийн аргыг ашиглан хиймэл нойр булчирхайн хиймэл бета эсийг үйлдвэрлэх урьдчилсан судалгаа хийж байна.

Магадгүй ирээдүйд өвчтэй хүмүүст энэ эрхтэний үйл ажиллагааг сайжруулахад ашиглагдах болно.

Орчин үеийн инсулины бэлдмэл үйлдвэрлэх нь автоматжуулалт, хүний хамгийн бага оролцоотой технологийн нарийн төвөгтэй үйл явц юм

Нэмэлт бүрэлдэхүүн хэсэг

Орчин үеийн ертөнцөд инсулиныг нэмэлт бодисгүйгээр үйлдвэрлэх нь төсөөлөх аргагүй юм, учир нь тэдгээр нь химийн шинж чанарыг сайжруулж, үйл ажиллагааны хугацааг уртасгаж, өндөр цэвэршилтэд хүрэх боломжтой юм.

Тэдний шинж чанараар бүх нэмэлт найрлагыг дараахь ангилалд хувааж болно.

пролонатор (эмийн урт хугацааны үйлчлэлийг хангахад ашигладаг бодис),
ариутгалын бүрэлдэхүүн хэсэг
тогтворжуулагч, үүнээс болж эмийн уусмал дахь хүчиллэг чанарыг оновчтой хэмжээнд байлгадаг.

Нэмэлтүүдийг сунгах

Биологийн идэвхжил нь 8-22 цаг (эмийн бүлгээс хамаарч) удаан үргэлжилдэг инсулинууд байдаг. Энэ нөлөө нь тарилгын уусмалд тусгай бодис - пролонтератор нэмснээс үүдэлтэй юм. Ихэнхдээ дараахь нэгдлүүдийн нэгийг энэ зорилгоор ашигладаг.

Мансууруулах бодисын үйл ажиллагааг удаашруулдаг уураг нарийвчлан цэвэршүүлэгддэг бөгөөд бага харшилтай байдаг (жишээлбэл, протамин). Цайрын давс нь инсулины үйл ажиллагаа болон хүний сайн сайхан байдалд сөргөөр нөлөөлдөггүй.

Инсулины найрлага дахь ариутгалын бодис зайлшгүй шаардлагатай бөгөөд ингэснээр хадгалах, ашиглах явцад нянгийн ургамал үрждэггүй. Эдгээр бодисууд нь хадгалах бодис бөгөөд эмийн биологийн идэвхжилийг хадгалдаг.

Нэмж хэлэхэд, хэрэв өвчтөн дааврын бэлдмэлийг нэг савнаас л өөрөө удирдаж байвал эм нь хэдэн өдөр үргэлжилж болно.

Өндөр чанарын бактерийн эсрэг бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн ачаар тэрээр микробын уусмалд нөхөн үржихүйн онолын хувьд онолын хувьд ашиглагдаагүй эмийг хаях шаардлагагүй болно.

Инсулин үйлдвэрлэхэд дараахь бодисыг ариутгагч бодис болгон ашиглаж болно.

Хэрэв уусмал нь цайрын ион агуулдаг бол тэдгээр нь нянгийн эсрэг үйлчилгээтэй тул нэмэлт хадгалалтын үүрэг гүйцэтгэдэг

Инсулины төрөл тус бүрийг үйлдвэрлэхэд ариутгалын тодорхой бүрэлдэхүүн хэсгүүд тохиромжтой байдаг. Эдгээр даавартай харилцан үйлчлэл нь эмнэлзүйн туршилтын үе шатанд судлагдах ёстой, учир нь консервант нь инсулины биологийн идэвхийг алдагдуулж, түүний шинж чанарт сөрөг нөлөө үзүүлэх ёсгүй.

Ихэнх тохиолдолд хадгалах бодис хэрэглэх нь дааврын бэлдмэлийг архи, согтууруулах ундаа эсвэл бусад антисептиктэй урьдчилан эмчлэхгүйгээр арьсны доор уух боломжийг олгодог (үйлдвэрлэгч нь ихэвчлэн зааварт дурьдагддаг).

Энэ нь эмийг хэрэглэх явцыг хялбарчилж, тарилга хийхээс өмнө бэлдмэлийн эмчилгээний тоог бууруулдаг.

Гэхдээ энэ зөвлөмж нь нимгэн зүү бүхий инсулин тариурыг бие даан хэрэглэвэл л хэрэг болно.

Тогтворжуулагч

Уусмалын рН-ийг тодорхой түвшинд байлгахын тулд тогтворжуулагч хэрэгтэй. Бэлдмэлийг хадгалах, түүний үйл ажиллагаа, химийн шинж чанарын тогтвортой байдал нь хүчиллэг байдлын түвшингээс хамаарна. Чихрийн шижинтэй өвчтөнд тарилгын даавар үйлдвэрлэхэд фосфатыг ихэвчлэн энэ зорилгоор ашигладаг.

Цайр бүхий инсулины хувьд уусмалын тогтворжуулагч нь үргэлж шаардлагатай байдаггүй, учир нь металлын ионууд нь тэнцвэрийг хадгалахад тусалдаг.

Хэрэв тэдгээрийг огт хэрэглэдэггүй бол фосфатын оронд бусад химийн нэгдлүүдийг ашигладаг, учир нь эдгээр бодисын нэгдэл нь хур тунадас, эмийн тохиромжгүй байдалд хүргэдэг.

Бүх тогтворжуулагчдад үзүүлсэн чухал шинж чанар бол аюулгүй байдал, инсулинтай ямар ч урвалд орох чадваргүй байдал юм.

Чадварлаг эндокринологич өвчтөн бүрийн өвчтөнд чихрийн шижингийн тарилгын эмийг сонгох асуудлыг шийдвэрлэх хэрэгтэй.

Инсулины үүрэг бол зөвхөн цусан дахь сахарын түвшинг хэвийн болгохоос гадна бусад эрхтэн, тогтолцоонд хор хөнөөл учруулахгүй байх явдал юм. Энэ эм нь химийн төвийг сахисан, харшил багатай, хямд байх ёстой.

Сонгосон инсулиныг үйл ажиллагааны үргэлжлэх хугацааны дагуу бусад хувилбаруудтай хольж хэрэглэх нь нэн тохиромжтой юм.